含藍(lán)莓花色苷谷物發(fā)酵物抗輻射作用的實(shí)驗(yàn)討論論文
電離輻射直接作用于核酸、蛋白質(zhì)(包括酶類(lèi))等生物大分子，使其發(fā)生電離、激發(fā)化學(xué)鍵的斷裂等，繼而造成其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的改變，最終導(dǎo)致細(xì)胞損傷，特別是DNA 的損傷 ;其也通過(guò)間接作用誘導(dǎo)產(chǎn)生超氧陰離子自由基、羥自由基等活性氧自由基，引起細(xì)胞內(nèi)DNA 的氧化、斷裂或堿基錯(cuò)配等現(xiàn)象，并最終誘發(fā)細(xì)胞死亡。因此，有關(guān)抗輻射的營(yíng)養(yǎng)干預(yù)措施研究備受關(guān)注。含藍(lán)莓花色苷的谷物發(fā)酵物( fermentedgrain-containing blueberry anthocyanins，藍(lán)禾LH)采用復(fù)合酶發(fā)酵工藝，含有多種活性成分，如花色苷、鋅及硒等，具有較強(qiáng)的抗氧化能力。本研究觀察LH 的抗輻射作用，旨在為抗輻射功能食品研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1 對(duì)象與方法
1.1 動(dòng)物分組與處理
清潔級(jí)昆明雄性小鼠50 只，6～7w 齡，體質(zhì)量18～22g(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物中心。小鼠隨機(jī)分為：正常對(duì)照(CN，灌胃蒸餾水17.5ml/kg bw，不輻照)、模型(M，灌胃蒸餾水17.5ml/kg bw+輻照)和低(L-LH 8.75ml/kg bw+輻照)、中(M-LH 17.5ml/kg bw+輻照)、高(H-LH35.08 ml/kg bw+輻照)劑量LH，共5 組，每組10 只。實(shí)驗(yàn)周期28d，每日灌胃1 次，每3 日測(cè)體質(zhì)量1 次，期間動(dòng)物自由攝食和飲水。D14，除CN 組外其余4 組小鼠接受4Gy、137Cs γ 射線全身照射一次， 吸收劑量率為0.775 ～ 0.760Gy/min。實(shí)驗(yàn)期結(jié)束，處死動(dòng)物，測(cè)定各指標(biāo)。
1.2 受試物L(fēng)H
以藍(lán)莓及黑米、江米、黍米等9 種谷物為原料，采用復(fù)合酶生物發(fā)酵工藝制成。LH 主要營(yíng)養(yǎng)成分含量(/L)：能量4950kJ，蛋白質(zhì)19.4g，碳水化合物170g，藍(lán)莓花色苷400mg，谷氨酸792.54 mg、門(mén)冬氨酸218.35 mg、丙氨酸103.1 mg等17 種氨基酸共1.67g，鎂140mg、鈣10.7 mg、鐵3.57 mg、鋅3.15 mg、銅0.26mg、硒6.1 μg。
1.3 輻射源及其條件
137Cs γ 射線輻射源(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所)，輻射源距離50 cm，其劑量率為0.760 Gy/min。
1.4 觀察指標(biāo)
細(xì)胞計(jì)數(shù)：輻照前1d，輻照后D3、D14，分3 次檢測(cè)，給藥后30 min，尾靜脈采血，用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(日本光電株式會(huì)社)測(cè)定白細(xì)胞數(shù)(WBC)，紅細(xì)胞數(shù)(RBC)和血小板數(shù)(PLT)。臟器指數(shù)：末次給藥前稱(chēng)重，給藥后1h，頸椎脫臼處死，剝離腦、胸腺及脾臟，稱(chēng)體質(zhì)量，計(jì)算腦指數(shù)、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)：末次給藥后1h,頸椎脫臼處死,分離股骨,用1ml 注射器共吸取5ml Hank’s 液, 沖出股骨中的全部骨髓細(xì)胞, 用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(日本光電株式會(huì)社)測(cè)定。血清MDA 含量、SOD 活性測(cè)定：末次給藥后30min，摘眼球取血，按照試劑盒(南京建成生物工程研究所)說(shuō)明書(shū)測(cè)定。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用SPSS21.0 軟件包，結(jié)果以x ±s 表示。CN、M 兩組比較采用t檢驗(yàn)，M 與LH 組之間比較采用單因素方差分析。
2 結(jié) 果
2.1 對(duì)137Csγ 射線照射
小鼠體質(zhì)量的影響小鼠體質(zhì)量呈增長(zhǎng)趨勢(shì),且組間變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
2.2 對(duì)137Csγ射線照射
小鼠外周血象的影響。與CN 比，M 小鼠外周血WBC、PLT 數(shù)量明顯降低(P<0.05)。照射后D3，M 及各LH 組小鼠外周血WBC 數(shù)量明顯低于照射前1d(P<0.05)。與其他4 組比，照射后D14 ，H-LH 小鼠外周血WBC數(shù)量顯著增高，且明顯高于照射后D3(P<0.05);與其他4 組比，H-LH 小鼠外周血PLT 含量顯著增高(P<0.05)。
2.3 對(duì)137Cs γ 射線照射
小鼠臟器指數(shù)的影響與CN 比，M 小鼠胸腺指數(shù)明顯降低(P<0.05)。
3 討 論
LH 可抑制小鼠胸腺指數(shù)的明顯降低，因其含有的微量元素鋅可直接影響胸腺細(xì)胞的增殖。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，機(jī)體受到輻射作用后，會(huì)對(duì)造血系統(tǒng)產(chǎn)生影響，而LH 可通過(guò)增加輻射損傷小鼠骨髓有核細(xì)胞數(shù)、外周血白細(xì)胞數(shù)及血小板數(shù)量保護(hù)小鼠造血系統(tǒng)。LH 含有抗氧化活性成分，可降低小鼠MDA 含量，增強(qiáng)SOD 活性。其主要活性成分花色苷可自身氧化釋放電子，直接清除自由基，發(fā)揮抗氧化作用;還可增加細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)換酶活性，減輕氧化應(yīng)激損傷。另外，LH中的礦物質(zhì)鋅、硒等是抗氧化酶的組成成分或激活劑，而硒還可直接清除自由基或與細(xì)胞膜結(jié)合構(gòu)成膜結(jié)合硒，發(fā)揮抗氧化功能。綜上所述，LH 可能通過(guò)增強(qiáng)免疫功能、提高抗氧化能力減緩小鼠輻射損傷。
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