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        核酸實驗室污染處理方案

        時間:2022-10-28 12:15:01 核酸實驗室污染處理方案 我要投稿

        核酸實驗室污染處理方案

          一、核酸實驗室介紹

          核酸檢測實驗室也就是我們所說的PCR實驗室,實驗室原則上分為4個單獨的工作區(qū)域,試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū),當(dāng)然有些實驗室也會有擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū),標(biāo)本制備區(qū)的空間要大一點。

          用換風(fēng)次數(shù)保證實驗室的潔凈度,其實核酸檢測實驗室要求最高的就是各個區(qū)域的正負(fù)壓,而且這些具備單相的人流、物流、和氣流。

          二、核酸實驗室污染處理方案(精選5篇)

          核酸是由許多核苷酸聚合而成的大分子化合物,其實也是蛋白質(zhì)生物合成必不可少的物質(zhì),是生物遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ),份子結(jié)構(gòu)相對而言,隨著現(xiàn)在人們對病毒的認(rèn)識,核酸也越來越重要。以下是小編精心整理的核酸實驗室污染處理方案(精選5篇),僅供參考,大家一起來看看吧。

          核酸實驗室污染處理方案1

          目前國內(nèi)所有二級以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測能力,大部分醫(yī)院也設(shè)立了PCR實驗室,高強(qiáng)度的核酸檢測任務(wù)已然成為了我們檢驗人的工作常態(tài),但是,如果一旦出現(xiàn)實驗室污染,可能會造成假陽性結(jié)果,導(dǎo)致結(jié)果不可信,甚至可能會危及實驗室工作人員安全。

          應(yīng)對核酸檢測實驗室污染的最好辦法就是防患于未然,今天就帶大家了解一下實驗中我們?nèi)绾伪苊夂蜏p少污染的產(chǎn)生以及處理污染。

          一、污染的產(chǎn)生

          在新冠病毒核酸檢測過程中,常見以下幾種污染類型:擴(kuò)增片段的污染(產(chǎn)物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及樣本間交叉污染。核酸檢測實驗室污染的主要來源是擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。

          實驗室應(yīng)通過以下途徑及時發(fā)現(xiàn)污染:

          1、采用每次檢測過程至少3個陰性對照隨機(jī)置于臨床樣本中間參與提取全過程。

          2、每天對實驗室內(nèi)空氣進(jìn)行采樣監(jiān)測?諝獗O(jiān)測范圍應(yīng)至少應(yīng)包括樣本制備區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。

          3、定期對實驗室臺面、門把手、儀器設(shè)備表面進(jìn)行取樣監(jiān)測。

          4、陽性樣本采用另外一到兩種更為靈敏且擴(kuò)增不同區(qū)域的核酸檢測試劑對原始樣本進(jìn)行復(fù)核檢測。

          二、污染的防控

          01嚴(yán)格實驗室功能分區(qū)

          原則上新冠病毒核酸檢測實驗室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域:試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)。

          根據(jù)使用儀器的功能,區(qū)域可適當(dāng)合并。各區(qū)域在物理空間上應(yīng)當(dāng)是完全相互獨立的。傳遞窗滿足密封性要求,不能有空氣的直接相通。各項檢測工作應(yīng)嚴(yán)格按相應(yīng)規(guī)定在各自的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,嚴(yán)禁在樣本制備區(qū)配制試劑。

          各區(qū)的功能是:

          1、試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū):貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。

          2、樣本制備區(qū):轉(zhuǎn)運箱的開啟,樣本的滅活(適用時),核酸提取及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管等。

          3、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū):核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。

          02確保實驗室人、物及空氣單向流動

          核酸檢測實驗室的人、物及空氣流向按照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū),防止擴(kuò)增產(chǎn)物隨人流、物流及空氣進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域?諝饬飨驊(yīng)按照從試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進(jìn)行。

          03實驗室檢測安全管理

         。1)基本要求

          核酸檢測應(yīng)當(dāng)在生物安全二級實驗室進(jìn)行,并應(yīng)在生物安全風(fēng)險評估的基礎(chǔ)上,采取適當(dāng)?shù)膫體防護(hù)措施,包括手套、口罩和隔離衣等。開展新冠病毒核酸檢測的實驗室應(yīng)當(dāng)制定實驗室生物安全相關(guān)程序文件及實驗室生物安全操作失誤或意外的處理操作程序,并有記錄。

         。2)實驗室前安全要求

          應(yīng)使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行桌面、臺面及地面消毒。消毒液需每天新鮮配制,不超過24小時。轉(zhuǎn)運至實驗室的標(biāo)本轉(zhuǎn)運桶應(yīng)在生物安全柜內(nèi)開啟。轉(zhuǎn)運桶開啟后,使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精對轉(zhuǎn)運桶內(nèi)壁和標(biāo)本采集密封袋進(jìn)行噴灑消毒。取出標(biāo)本采集管后,應(yīng)首先檢查標(biāo)本管外壁是否有破損、管口是否泄露或是否有管壁殘留物。確認(rèn)無滲漏后,推薦用0.2%含氯消毒劑噴灑、擦拭消毒樣品管外表面(此處不建議使用75%酒精,以免破壞標(biāo)本標(biāo)識)。如發(fā)現(xiàn)滲漏應(yīng)立即用吸水紙覆蓋,并噴灑有效氯含量為0.55%的含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理,不得對標(biāo)本繼續(xù)檢測操作,做好標(biāo)本不合格記錄后需立即進(jìn)行密封打包,壓力蒸汽滅菌處理后銷毀。

          如為采樣管為非滅活管,實驗室操作人員在進(jìn)行標(biāo)本熱滅活時,溫浴前需旋緊標(biāo)本采集管管蓋,必要時可用封口膜密閉管蓋;溫浴過程中可每隔10分鐘將標(biāo)本輕柔搖勻1次,以保證標(biāo)本均勻滅活;溫浴后標(biāo)本需靜置至室溫至少10分鐘使氣溶膠沉降,隨后再開蓋進(jìn)行后續(xù)核酸提取。

         。3)核酸提取和檢測安全要求

          標(biāo)本進(jìn)行核酸提取和檢測時應(yīng)盡可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作。如為打開標(biāo)本管蓋或其他有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作,則必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

         。4)實驗室結(jié)束后清潔要求。

          需要對實驗室環(huán)境進(jìn)行清潔,消除可能的核酸污染。

         、賹嶒炇铱諝馇鍧崱嶒炇颐看螜z測完畢后,可采用房間固定和/或可移動紫外燈進(jìn)行紫外照射2小時以上。必要時可采用核酸清除劑等試劑清除實驗室殘留核酸。

          ②工作臺面清潔。每天實驗后,使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行臺面、地面清潔。

         、凵锇踩裣尽嶒炇褂煤蟮暮牟膹U棄物放入醫(yī)療廢物垃圾袋中,包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精噴灑消毒其外表面。手消毒后將垃圾袋帶出生物安全柜放入實驗室廢棄物轉(zhuǎn)運袋中。試管架、實驗臺面、移液器等使用75%酒精進(jìn)行擦拭。隨后關(guān)閉生物安全柜,紫外燈照射30分鐘。

         、苻D(zhuǎn)運容器消毒。轉(zhuǎn)運及存放標(biāo)本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。

         、菟芰匣蛴袡C(jī)玻璃材質(zhì)物品清潔:使用0.2%含氯消毒劑或過氧乙酸或過氧化氫擦拭或噴灑。

          (5)轉(zhuǎn)運容器消毒

          轉(zhuǎn)運及存放樣本的容器使用前后需使用有效氯含量為0.2%的消毒劑或75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。

          04強(qiáng)化實驗室檢測過程控制

          實驗室接到樣本后,應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)對樣本進(jìn)行清點核對。按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行試劑準(zhǔn)備、樣本前處理、核酸提取、核酸擴(kuò)增、結(jié)果分析及報告。實驗室應(yīng)當(dāng)建立可疑樣本和陽性樣本復(fù)檢的流程。

         。1)試劑準(zhǔn)備

          應(yīng)當(dāng)選擇國家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)的試劑,并在選擇樣本采樣管和核酸提取試劑時,使用試劑盒說明書上建議的配套樣本采樣管和提取試劑。

         。2)樣本滅活

          已經(jīng)使用含肌鹽的滅活型樣本采樣管的實驗室,這一環(huán)節(jié)無需進(jìn)行滅活處理,直接進(jìn)行核酸提取。使用非滅活型樣本采樣管的實驗室,可采用56℃孵育30分鐘熱滅活的處理方式。

         。3)核酸提取

          將滅活后的樣本取出,在生物安全柜內(nèi)打開樣本采樣管加樣。核酸提取完成后,立即將提取物進(jìn)行封蓋處理。在生物安全柜內(nèi)將提取核酸力口至PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中。

         。4)核酸擴(kuò)增

          將擴(kuò)增體系放入擴(kuò)增儀,核對擴(kuò)增程序是否與試劑說明書相符,啟動擴(kuò)增程序。擴(kuò)增后的反應(yīng)管不要開蓋,直接放于垃圾袋中,封好袋口,按一般醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)移出實驗室處理。

          三、污染的消除

          實驗室一旦發(fā)生污染,檢測工作應(yīng)立即停止,直到確認(rèn)消除污染后才能重新開始檢測。首先,要查找污染源和明確污染范圍。然后,根據(jù)污染源和污染范圍采取有效的去污染措施,結(jié)合各種不同方法以達(dá)到最佳效果。

          實驗室污染的處理:

          1.標(biāo)本污染生物安全柜的操作臺造成局限污染時:立即用吸水紙覆蓋,并使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行噴灑消毒。消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配,24小時內(nèi)使用。

          2.標(biāo)本傾覆造成實驗室污染時:

          保持實驗室空間密閉,避免污染物擴(kuò)散。立即使用潤濕有0.55%含氯消毒劑的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(如大量溢撒時)可用過氧乙酸加熱熏蒸實驗室,劑量為2g/m,熏蒸過夜;或20g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧,用量8ml/m,作用1-2小時;必要時或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸:高錳酸鉀8g/m,放入耐熱耐腐蝕容器(陶罐或玻璃容器),后加入甲醛(40%)10ml/m,熏蒸4小時以上。熏蒸時室內(nèi)濕度60%-80%。

          3.清理污染物時:

          嚴(yán)格遵循活病毒生物安全操作要求,采用壓力蒸汽滅菌處理,并進(jìn)行實驗室換氣等,防止次生危害。

          核酸實驗室污染處理方案2

          發(fā)現(xiàn)污染第一步就是要暫停實驗,評估假陽性對以往檢測結(jié)果的影響。對實驗進(jìn)行徹底打掃和清理,盡可能更換相關(guān)的試劑耗材,對儀器設(shè)備進(jìn)行清潔和去核酸處理。

          1.化學(xué)處理法

          使用商品化的核酸去除劑,核酸去除劑是一種非堿性、無腐蝕性的核酸去除溶液,對人體無害的非致癌性物質(zhì)組成,通過對基礎(chǔ)RNA和DNA的非可逆性摧毀,達(dá)到去除核酸污染的目的。對人體無毒無害。

          2.物理處理法

          使用紫外燈照射。

          核酸污染處理的難點

          1.移液器

          移液器內(nèi)部被污染很難去除,可以通過清洗或者另換一套移液器。

          2.生物安全柜

          移除內(nèi)部所有物品,用核酸去除劑擦拭表面后,打開柜門連續(xù)運行。

          3.核酸提取儀內(nèi)部

          用核酸去除劑擦拭內(nèi)表面后,打開提取儀門或外罩,靜置。

          如果能及時發(fā)現(xiàn)污染,通常情況不會太嚴(yán)重,采取上述措施實驗室空置幾天污染會消除。但是如果發(fā)生了很嚴(yán)重的污染,采取上述措施污染仍不能消除,就要采取專業(yè)的設(shè)備方案進(jìn)行去除:

          歐菲姆核酸干霧消毒器,采用獨有的干霧發(fā)散遠(yuǎn)離,配合低溫冷蒸發(fā)技術(shù),可以將核酸去除液發(fā)散成平均粒徑1微米的顆粒。均勻的擴(kuò)散在空氣中,無死角的覆蓋在整個核酸實驗室,并快速吸附空氣中的氣溶膠,分解掉核酸污染源。

          歐菲姆核酸去除干霧消毒器適用于微生物實驗室、動物房實驗室、PCR實驗室、P3及P4實驗室,是當(dāng)下國內(nèi)去除PCR實驗室核酸污染的`佼佼者。

          核酸實驗室污染處理方案3

          疫情在全球的大流行對各國公共衛(wèi)生和全球經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重威脅,了解和遏制新冠病毒的環(huán)境傳播模式對各國制定相關(guān)公共衛(wèi)生政策至關(guān)重要。早發(fā)現(xiàn)并進(jìn)行流動性管控是快速控制新冠病毒傳播的方法,新冠病毒核酸熒光定量PCR檢測由于其高靈敏度和準(zhǔn)確性成為公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)。

          在新冠病毒檢測中,核酸檢測結(jié)果是主要的判定依據(jù),而分子實驗室環(huán)境的清潔程度是保證核酸檢測結(jié)果準(zhǔn)確的必要條件。高效DNA清除劑能夠降解長片段核酸和PCR后短片段核酸產(chǎn)物,經(jīng)過電泳未見明顯條帶;通過qPCR檢測核酸剩余量,顯示清除效率達(dá)到了99.9%;對桌面、儀器等表面處理,其表面累積的核酸量也有很明顯的降低。DNA清除劑為分子實驗室日常清潔處理和已發(fā)生核酸污染的實驗室處理提供了解決思路。

          分子診斷實驗室常見的消毒殺菌方法:

          1、紫外光照射和高壓滅菌來處理實驗耗材中的DNA污染,有實驗證明,高壓滅菌(128℃,420min)后,再次干燥,暴露于10~60J/cm2的紫外光照射下能夠清除,但此方法耗費時間長并且紫外線透射度有限、高壓滅菌對耗材有選擇性等局限。

          2、無菌醫(yī)療產(chǎn)品常用環(huán)氧乙烷(EO)氣體來滅菌,通過EO處理3h可使PCR擴(kuò)增的DNA減少104個數(shù)量級,因此利用EO來阻止DNA擴(kuò)增的方法是有效的,但是EO并不能完全清除DNA污染,且作用后會有副產(chǎn)物遺留,導(dǎo)致這種方法難以在分子實驗室應(yīng)用。

          因此,需要尋求一種更便捷的辦法來預(yù)防或減少核酸污染。核酸清除劑是目前市面上商品化使用的專門清除核酸污染的試劑,針對性強(qiáng)、效果好且毒性小。潤聯(lián)環(huán)保旗下的諾沃賽德核酸清除液,諾沃賽德Novocide是國內(nèi)唯一一款可以用于空間噴霧的核酸去除劑,試劑特點:不含過氧化氫,PH值接近中性,不含酶,強(qiáng)效的DNA的片段捕捉粘合劑,腐蝕性極低。

          諾沃賽德核酸污染去除液,能夠強(qiáng)力高效的去除實驗室中核酸污染問題。搭配比林科漢核酸污染清除儀能夠達(dá)到1+1>2的效果。比林科漢核酸污染清除儀采用獨特的干霧發(fā)散原理,超高速噴射,可以將核酸清除劑發(fā)散成小于1微米的顆粒,均勻擴(kuò)散到空氣中,以氣溶膠的形式捕獲核酸片段并分解掉污染源。其優(yōu)點是覆蓋面積廣,納米級干霧滲透性好,氣溶膠均勻擴(kuò)散,智能化系統(tǒng),單位用量少成本低。非常適合分子診斷實驗室去除核酸污染。

          核酸實驗室污染處理方案4

          由于疫情的突發(fā),各地PCR基因擴(kuò)增實驗室的建設(shè)也逐步加快,病毒核酸檢測是診斷的重要標(biāo)準(zhǔn),pcr實驗室又稱為基因擴(kuò)增實驗室,利用分子生物學(xué)技術(shù),通過放大核酸片段,也可以看做是生物體外的特殊核酸復(fù)制。利用基因追蹤系統(tǒng),掌握人體內(nèi)部的病毒含量,試驗的精確度可達(dá)到納米級別,核酸檢測也屬于此類技術(shù),診斷的重要標(biāo)準(zhǔn)。

          PCR基因擴(kuò)增實驗室主要就是對檢測核酸模板進(jìn)行擴(kuò)增,由此可見,易出現(xiàn)的就是對實驗室交叉污染而導(dǎo)致檢測的標(biāo)本出現(xiàn)假陽性結(jié)果,所以,PCR實驗室對預(yù)防交叉污染有著嚴(yán)格的設(shè)計要求和標(biāo)準(zhǔn)。

          現(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)在傳染病、腫瘤靶向、生殖遺傳等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,但因為該技術(shù)對待測核酸進(jìn)行了多次、大量的擴(kuò)增,所以即使極微量的污染也容易導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)假陽性;其次PCR技術(shù)要求相對較高,實驗過程繁復(fù),中間環(huán)節(jié)如果出現(xiàn)遺漏疏忽,就有可能導(dǎo)致結(jié)果假陰性。

          PCR實驗過程中易發(fā)生污染產(chǎn)生污染主要有以下4個原因:

          1、是PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。這也是見的污染原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)反復(fù)多次的擴(kuò)增,其復(fù)制量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過PCR的檢測極限,所以即使是極微量的污染也足以造成實驗結(jié)果假陽性。

          2、試劑的污染。在試劑的配制過程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。

          3、待測樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過程中使用了被污染的移液器或槍頭導(dǎo)致樣品被污染;另外,某些樣品中含毒,若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。

          4、氣溶膠污染。若氣溶膠中包含病毒等污染物擴(kuò)散至空氣中極有可能造成PCR產(chǎn)物污染。氣溶膠是由空氣與液體表面摩擦而產(chǎn)生的,開蓋、晃動反應(yīng)管及污染加樣器的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠從而導(dǎo)致交叉污染。據(jù)計算一個氣溶膠顆?珊48000拷貝,因此,應(yīng)尤其重視由氣溶膠導(dǎo)致污染的問題。PCR實驗室只要出現(xiàn)了污染,之前的結(jié)果報告就變?yōu)闊o效而且也無法進(jìn)行其他的實驗操作。必須找出并清除污染源,才能得到準(zhǔn)確有效的實驗結(jié)果。

          Pcr實驗室如何進(jìn)行空間消毒預(yù)防污染?

          針對pcr實驗室的消毒,法國進(jìn)口的歐菲姆干霧滅菌設(shè)備,采用先進(jìn)的過氧化氫干霧滅菌技術(shù),達(dá)到枯草芽孢桿菌2.5×10的6次方的殺滅率。方便快捷,滅菌時間快,腐蝕性極低,安全無殘留。

          法國歐菲姆過氧化氫干霧滅菌器采用了進(jìn)的霧化技術(shù),霧化顆粒小于3微米,增效了空間擴(kuò)散均勻性,迅速彌漫充滿整個空間,不放過每一處死角,滅菌效果。適應(yīng)大空間滅菌,小空間滅菌更靈活。

          歐菲姆過氧化氫滅菌優(yōu)勢:

          1、殺菌效果好,對嗜熱脂肪桿菌芽孢10分鐘有6個對數(shù)值的殺滅率,快速高效去除實驗室核酸污染源。

          2、廣譜的殺菌能力,能殺滅包括病原菌、芽孢、及病毒在內(nèi)的200多種微生物。

          3、干霧顆粒,擴(kuò)散性非常優(yōu)良,能擴(kuò)散到每一個衛(wèi)生死角落,在空氣中做不規(guī)則布朗運動。

          4、無殘留,安全可靠,分解。驗證資料齊全,提供驗證模板。

          5、殺菌時間超短,設(shè)備體積小,操作方便,靈活移動滿足不同空間需求,適應(yīng)大空間滅菌。

          核酸實驗室污染處理方案5

          近年來,核酸檢測技術(shù)在我國得到逐步的推廣和應(yīng)用,并已成為血液篩選查實實驗室的重要實驗手段,但因其靈敏度高的特點,同時實驗室也容易導(dǎo)致污染,特別是核酸的氣溶膠污染比較嚴(yán)重。如何預(yù)防和處理PCR核酸實驗室污染為本文討論的重點。

          關(guān)鍵詞:分子診斷,核酸檢測,核酸污染,DNA,RNA,PCR,DNA測序,原位雜交,SNP,基因芯片,假陽性。

          核酸污染是困擾絕大多實驗室的一個難題。微量的核酸污染會產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果,這樣會對病人造成誤診,耽誤病情。如任由此情況發(fā)展,會形成氣溶膠污染而擴(kuò)散,終導(dǎo)致整個實驗室的污染,嚴(yán)重的會關(guān)閉實驗室,如無備用實驗室,會造成更大的損失。是否有一種快速徹底的解決方案呢?且看下面。

          分子診斷是指利用分子生物學(xué)方法來檢測樣品中遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化從而做出相應(yīng)診斷的技術(shù)。由于分子生物技術(shù)的發(fā)展,人們生活水平不斷提高記憶對健康問題更為重視,分子診斷得以迅猛發(fā)展,市場份額快速提高。我國分子診斷產(chǎn)業(yè)雖然起步較晚,但現(xiàn)已與歐美,日本,新加坡等起步較早的國家之間的的差距也越來越小。

          而由于日常檢測中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性,核酸污染是困擾絕大多實驗室的一個難題。微量的核酸污染會產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果,這樣會對病人造成誤診,耽誤病情。如任由此情況發(fā)展,會形成氣溶膠污染而擴(kuò)散,終導(dǎo)致整個實驗室的污染,嚴(yán)重的會關(guān)閉實驗室,如無備用實驗室,會造成更大的損失。

          在與核酸污染長期抗?fàn)幹,人們也總結(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對于預(yù)防,實驗人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實驗室操作流程,對實驗室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分,分裝試劑,定期對實驗儀器進(jìn)行滅菌,實驗室適當(dāng)通風(fēng),養(yǎng)成實驗中進(jìn)行陰陽對照的好習(xí)慣。

          當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn),傳統(tǒng)的清除方法包括對可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡,紫外線照射,對反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對一些微量污染會有一定效果,但對污染效果不是很理想,而且紫外線照射會對人體造成一定的危害。

          污染傳統(tǒng)處理方法:

          準(zhǔn)備(1:50)、(1:10)高效消毒液,75%無水酒精。

          2.5.1把STAR上的所有載架都拿出來,用1:50的高效消毒液進(jìn)行擦拭,待作用五分鐘后用清水沖洗。

          2.5.2SATR內(nèi)部用噴壺噴灑75%無水酒精,底部金屬部分可用1:50的高效消毒液進(jìn)行擦拭,待酒精完全沉降后,用清水擦拭。

          2.5.3實驗室內(nèi)工作臺用1:10的高效消毒液進(jìn)行擦拭,實驗室內(nèi)部用噴壺噴灑1:50的高效消毒液,等待空氣中的高效消毒液沉降后,用1:50的高效消毒液拖地,建議當(dāng)天不用清水擦拭或拖地,待第二天早上來再用清水擦拭拖地。

          2.5.4實驗室用的耗材(除用自封袋封好的),能滅菌的,均用備用滅菌鍋進(jìn)行一次滅菌。

          2.5.5機(jī)器通道污染的處理,將配置好的高效消毒液(1:50)代替裂解液,加入裂解液槽里,完成加裂解液的過程,在機(jī)器每次吸取一定量的高效消毒液后,暫停十分鐘,讓高效消毒液揮發(fā)到通道內(nèi)部,反復(fù)四次即可,這個過程中用的槍尖同樣不帶濾芯。后將裂解液槽里的高效消毒液(1:50)用水洗凈后換上蒸餾水重復(fù)以上程序。(此類方法正常情況下不建議使用,只有在污染去除不了時才慎重使用。用該方法處理過機(jī)器后,當(dāng)天不再做核酸實驗)。

          總之,對于核酸污染大家一定要給予足夠的重視,提前預(yù)防,不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除,經(jīng)常在實驗室中配備清除污染的試劑,發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理,相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實驗人員頭疼的問題。

          注:實驗室的污染不可能一次就清理干凈,需反復(fù)清理驗證,直到實驗結(jié)果能被采用為止。

          核酸實驗室污染的主要原因有:

          1)標(biāo)本污染;2)試劑污染;3)產(chǎn)物污染;5)其他污染。

          其解決措施為:其解決措施為:

          1)標(biāo)本污染,重新采樣進(jìn)行檢測,評估標(biāo)本前處理環(huán)節(jié);

          2)試劑污染,更換新的試劑重新檢測評估;

          3)設(shè)備污染,設(shè)備整體消毒清潔、維護(hù);

          4)產(chǎn)物污染,全面清潔消毒實驗室、儀器設(shè)備所有實驗有關(guān)用品。一旦發(fā)生污染后,圍繞實驗室尋找污染源分析污染原因耗時且很繁瑣,所以防止污染重在預(yù)防。

          因核酸實驗室污染后極其難以清除,有可能造成實驗室不能使用的風(fēng)險。但是如果一旦出現(xiàn)核酸實驗室污染,除了上面常規(guī)的消毒清潔方法之外,另外還有一種比較好使而且快速全面徹底的實驗室空間滅菌方法。根據(jù)國外DNA研究所大量實踐證明空間熏蒸消毒確實有效去除核酸污染源,時間短、高效、安全、節(jié)省勞動力等等優(yōu)點。此空間熏蒸消毒方法為法國過氧化氫干霧消毒技術(shù),整體核酸實驗室覆蓋,無死角,快速分解掉核酸污染源,消毒完后,隨著排風(fēng)即可清除而無殘留,省時省力。特別適用核酸實驗室氣溶膠污染。

          在眾多的過氧化氫消毒技術(shù)當(dāng)中,據(jù)大數(shù)據(jù)得知,法國的過氧化氫干霧消毒技術(shù)由oxypharm制造的消毒機(jī)力壓群雄,成為行業(yè)消毒去除PCR實驗室核酸污染的佼佼者。(高效并且持久)

          法國oxy過氧化氫干霧消毒方案的精妙之處在于的解決方案,巧妙利用了特別的干霧設(shè)備+過氧化氫殺孢子劑(高純低濃度)的完美配合,組成無懈可擊空間消毒方案,避免了過氧化氫蒸汽的腐蝕性和解決了擴(kuò)散性問題。

          oxypharm過氧化氫消毒器采用獨到而特殊的結(jié)構(gòu)設(shè)計,使得在僅僅輸入電能的情況下,集壓縮、ventur噴射和霧滴內(nèi)外部濺射碎化功能于一體,使專用液態(tài)殺孢子劑變成氣霧狀態(tài)極微小顆粒噴出,高速極小微粒與空氣接觸后充分氣化,變成氣態(tài)過氧化氫即為“干霧”。此干霧具備良好的擴(kuò)散性和細(xì)菌殺滅效果。

          此過氧化氫干霧消毒器的特點為:

          1、滅菌效果好,生物指示劑挑戰(zhàn)降低6lg對數(shù)值,能徹底殺滅環(huán)境中的MRSA、VRE、結(jié)核分枝桿菌、芽孢、病毒和多重耐藥的革蘭陰性菌(鮑曼不動桿菌);

          2、活性氫氧基團(tuán)能高效分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物質(zhì);

          3、快速空間滅菌,比起噴霧或熏蒸所需要的時間更短,實現(xiàn)更快速的密閉空間滅菌措施,預(yù)防核酸實驗室環(huán)境空氣污染及核酸片氣溶膠污染,及快速高效去除實驗室核酸污染源;

          4、小于3微米干霧氣體,擴(kuò)散性優(yōu)越,能擴(kuò)散到每一個角落,空氣中做布朗運動,消毒干霧無孔不入,專門對付小分子核酸污染源物質(zhì);

          5、消毒干霧相對一般過氧化氫穩(wěn)定,自然損耗小,維持的滅菌濃度均勻,基本不受溫度、環(huán)境濕度的影響(真正的干霧才能做到這點);

          6、無色無毒,無殘留,安全可靠,當(dāng)天使用消毒清除污染,當(dāng)天即可使用實驗室,換回?fù)p失。

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