生物實(shí)驗(yàn)報告(集合15篇)
在經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的今天，報告有著舉足輕重的地位，多數(shù)報告都是在事情做完或發(fā)生后撰寫的。我們應(yīng)當(dāng)如何寫報告呢？以下是小編收集整理的生物實(shí)驗(yàn)報告，歡迎大家分享。
生物實(shí)驗(yàn)報告1
實(shí)驗(yàn)日期： 年月 日
組長： 組員：
一、實(shí)驗(yàn)要求
1、練習(xí)使用顯微鏡，學(xué)習(xí)規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)⒉Ｆ瑯?biāo)本移動到視野中央，并看到清晰的圖像。
二、實(shí)驗(yàn)原理
三、材料用具
顯微鏡，寫有“上”字的玻片，動物、植物玻片標(biāo)本，擦鏡紙，紗布。
四、方法與步驟
�。ㄒ唬┤＄R和安放
1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座
2、把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
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3、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔（物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離）。
4、把一個較大的光圈對準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)（右眼睜開，便于以后同時畫圖）。轉(zhuǎn)動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡，以看到白亮的視野。
�。ㄈ┯^察
5、把所要觀察的玻片標(biāo)本（也可以用印有“e”字的薄紙片制成）放在載物臺上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對通光孔的中心。
6、轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標(biāo)本）。
7、左眼向目鏡內(nèi)看，同時反方向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
注意事項(xiàng)：
1、實(shí)驗(yàn)完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，把兩個物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，
生物實(shí)驗(yàn)報告2
生物學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)科學(xué)。生物新課程倡導(dǎo)面向全體學(xué)生、提高生物科學(xué)素養(yǎng)和探究性學(xué)習(xí)的課程理念。其中探究學(xué)習(xí)是讓學(xué)生在主動參與的過程中進(jìn)行學(xué)習(xí)，讓學(xué)生在探究問題的活動中獲取知識，了解科學(xué)家的工作方法和思維方法，學(xué)會科學(xué)研究所需要的各種技能，領(lǐng)悟科學(xué)觀念，培養(yǎng)科學(xué)精神。這種學(xué)習(xí)的方式的中心是針對問題的探究活動，當(dāng)學(xué)生面臨各種讓他們困惑的問題時，他就要想法尋找答案。
在解決問題時，要對問題進(jìn)行推理、分析，找出問題解決的方向，然后通過觀察、實(shí)驗(yàn)來收集事實(shí)，通過對獲得的資料進(jìn)行歸納、比較、統(tǒng)計分析，形成對問題的解釋。最后通過討論和交流進(jìn)一步澄清事實(shí)，發(fā)現(xiàn)新的問題，對問題進(jìn)行更深入的研究。
在此背景理念依據(jù)下，在教學(xué)中教學(xué)模式也將發(fā)生根本的改變，生物課將更多地開展學(xué)生的試驗(yàn)、討論、交流等活動。引導(dǎo)學(xué)習(xí)教學(xué)模式就是在這種背景下構(gòu)建的。具體的模式結(jié)構(gòu)：問題——閱讀、實(shí)驗(yàn)——分析、推理、歸納、討論——結(jié)論。
在運(yùn)用這種模式的過程中我有下面幾點(diǎn)感觸：
1、在教師的引導(dǎo)下學(xué)生可帶者問題去閱讀、分析、討論資料，達(dá)到解決問題的目的。比如：在學(xué)習(xí)〈空中飛行的動物〉時，教師可這樣引導(dǎo)學(xué)生；想一想，我們?nèi)艘朐谔炜兆杂勺栽诘娘w翔必須先解決什么問題？
學(xué)生思考后說；一是，解決了動力問題。二是，解決了地心引力問題。教師隨后提出問題：鳥是如何解決這些問題的？引導(dǎo)學(xué)生思考，讓學(xué)生帶著問題去看書、閱讀、討論、交流、的出結(jié)論。這樣既可提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，改變學(xué)習(xí)方式，又符合新課程的要求。
2、合理開發(fā)的有效地利用一切可以利用的課程資源是實(shí)現(xiàn)課程目標(biāo)，轉(zhuǎn)變學(xué)生學(xué)習(xí)方式的關(guān)鍵條件。知識、技能、經(jīng)驗(yàn)、活動方式方法等都是課程資源。在學(xué)習(xí)〈水中生活的動物〉時，對于生活在我這些地方的學(xué)生來說，對水中的動物了解不多，而且上課時還不能做試驗(yàn)，學(xué)生缺少感性的認(rèn)識，這時教師就要引導(dǎo)學(xué)生開發(fā)自己已有的課程資源。如：學(xué)習(xí)魚鰭的作用時引導(dǎo)學(xué)生想想：獨(dú)槳船和雙槳船他們的槳各起什么作用？在學(xué)習(xí)魚兒離開水為什么會死？教師可引導(dǎo)學(xué)生回憶：頭發(fā)在水中水什么樣的？從水中出來時又是什么樣的？這樣就很容易理解知識，解決了問題。
3、信息化是當(dāng)今世界經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展的大趨勢。新課程注重現(xiàn)代信息技術(shù)與生物新課程的整合。這樣可有效地應(yīng)用數(shù)字化的優(yōu)勢達(dá)到學(xué)習(xí)目標(biāo)。教師用編制成的演示文稿、多媒體課件來引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)或作為學(xué)生自主學(xué)習(xí)的資源。
在課程學(xué)習(xí)中，利用諸多的文字處理、圖形圖像處理、信息集成等工具，讓學(xué)生對課程學(xué)習(xí)內(nèi)容進(jìn)行重組、創(chuàng)作，不僅使學(xué)生獲得知識，而且能夠幫助學(xué)生建構(gòu)知識。但是，教師在制作多媒體課件時，把每個知識點(diǎn)、每個環(huán)節(jié)設(shè)計的過于完美，在教師的引導(dǎo)下學(xué)生很簡單的就可掌握知識，完成教學(xué)任務(wù)。但也存在著弊端，這就是學(xué)生的自主學(xué)習(xí)不到位，在獲得知識的過程中缺少自主探究的過程。這個問題就是我發(fā)現(xiàn)的問題和努力改進(jìn)的方面。
生物實(shí)驗(yàn)報告3
實(shí)驗(yàn)名稱：
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài)，觀察細(xì)胞質(zhì)的流動，可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動做為標(biāo)志。
三、材料用具
蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養(yǎng)皿，鉛筆
四、實(shí)驗(yàn)過程（見書Ｐ30）
1．制作蘚類葉片的臨時裝片
2．用顯微鏡觀察葉綠體
3．制作黑藻葉片臨時裝片
4．用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動
物理實(shí)驗(yàn)報告 ·化學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 ·生物實(shí)驗(yàn)報告 ·實(shí)驗(yàn)報告格式 ·實(shí)驗(yàn)報告模板
五、討論
1．細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動，為什么？
2．葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系？
3．植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài)，這對于活細(xì)胞完成生命活動有什么意義？
4．用鉛筆畫一個葉片細(xì)胞，標(biāo)出葉綠體的大致流動方向。
生物實(shí)驗(yàn)報告4
霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察：實(shí)驗(yàn)一真菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
�。�1）了解培養(yǎng)基的配置原理和方法，掌握分離培養(yǎng)微生物的有關(guān)準(zhǔn)備工作。
（2）掌握高壓滅菌方法及原理
實(shí)驗(yàn)原理：
�。�1）培養(yǎng)基的制備原理：
培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。
從營養(yǎng)角度分析：
營養(yǎng)：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機(jī)鹽等；?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力；?一定的氧化還原電位；?合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì)，是應(yīng)用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復(fù)融化，其凝固性降低。
�。�2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫
度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
配制培養(yǎng)基所需器材
實(shí)驗(yàn)設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器。
實(shí)驗(yàn)器材：500ml三角燒瓶、藍(lán)蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、
稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養(yǎng)基等集中放講臺前高壓桶內(nèi)，送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項(xiàng)
高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養(yǎng)基113℃，15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項(xiàng)：空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）。
a.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。
b.瓶口要過火焰。
c.左手掀開平皿小口。
d.傾注滿皿底再多一點(diǎn)，約10ml（7cm直徑平皿）。
e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養(yǎng)過程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉(zhuǎn)平板放塑料筐內(nèi)，4℃?zhèn)溆谩?/p>
分析與討論
�。�1）如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底?
把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內(nèi)的不同位置，每處抽取數(shù)管(瓶)，標(biāo)上記號，置25℃～30℃培養(yǎng)一周左右進(jìn)行檢查。如果培養(yǎng)基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導(dǎo)致蒸汽不暢，或鍋的結(jié)構(gòu)不合理等原因所致，應(yīng)根據(jù)上述情況進(jìn)行改進(jìn)；如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應(yīng)提高壓力或延長滅菌時間。經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
�。�2）為什么說消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進(jìn)入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預(yù)防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達(dá)到預(yù)防疾病的目的。實(shí)際上，除了在臨床醫(yī)療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過程中都需要避免微生物的污染。
實(shí)驗(yàn)二霉菌的接種與培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：掌握霉菌與酵母菌的接種與培養(yǎng)方法。
實(shí)驗(yàn)原理：
接種是微生物實(shí)驗(yàn)及科學(xué)研究中一項(xiàng)基本操作技術(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?/p>
選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無菌操作。
無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進(jìn)行，所有器皿均須嚴(yán)格消毒，培養(yǎng)基應(yīng)事先做無菌試驗(yàn)，
接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時應(yīng)注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細(xì)菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種，以及人和動物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）條件下生長良好。多數(shù)放線菌為好氧菌，少數(shù)為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長（PH7.5～8.5）。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
�。�1）實(shí)驗(yàn)材料：實(shí)驗(yàn)設(shè)備：溫箱。
實(shí)驗(yàn)器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細(xì)黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
�。�2）實(shí)驗(yàn)方法：平板接種：毛霉→PDA平板（點(diǎn)植法）
啤酒酵母→PDA平板（五區(qū)分離劃線法）青霉、曲霉→PDA平板（連續(xù)劃線法）
小室載玻片培養(yǎng)法：
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無菌PDA瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。
3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養(yǎng)基四周，用無菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并(轉(zhuǎn)載于:l滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標(biāo)記，置28～30℃培養(yǎng)3～5d
糧食產(chǎn)品的平板接種：
1.取糧食樣品20g,放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，
反復(fù)10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內(nèi)備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內(nèi)，每皿可接種5-10粒。
放線菌的接種：取細(xì)黃鏈霉菌劃線法接種，在接種的劃線處，無
菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。
注意事項(xiàng)：
1.空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）
2.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。
3.接種環(huán)使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環(huán)和金屬絲燒紅即可。
4.接種環(huán)使用后，先在火焰周圍把環(huán)上標(biāo)本烤干，再燒灼滅菌，以免標(biāo)本汽化，爆烈四濺，污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過火焰2－3次，殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類及產(chǎn)生毒素？
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細(xì)黃鏈霉菌（放線菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細(xì)黃鏈菌素
2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些？
馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基
豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基
3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？
�。�1）連續(xù)劃線法（青霉、曲霉）
青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應(yīng)采用連續(xù)劃線接種法接種。（2）點(diǎn)植法（根霉、毛霉）
根霉與毛霉生長區(qū)域比較大，應(yīng)采用點(diǎn)植法。（3）小室載玻片培養(yǎng)法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）
實(shí)驗(yàn)三霉菌的制片與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的.基本方法；
了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。
實(shí)驗(yàn)原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多（約為3-10μm）,常是細(xì)
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大，細(xì)胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標(biāo)本時常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液，用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細(xì)胞不變形，具有殺菌、防腐作用，不易干燥，能保持較長時間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍(lán)色能增大反差。
實(shí)驗(yàn)材料：
�。ㄒ唬┚N：在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉（Mucorsp.）、根霉；
（二）器材及用具：鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)方法：
�。ㄒ唬┲苯又破^察
于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡（二）小室培養(yǎng)觀察
將載玻片直接放低倍鏡下觀察，再換高倍鏡觀察。
觀察原則：
毛霉：用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀察有無假根。
曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子著生位置，辨認(rèn)分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
分析與討論：
青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同？
青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)的每一個分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進(jìn)行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結(jié)構(gòu)的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查？
生物實(shí)驗(yàn)報告5
實(shí)驗(yàn)名稱：
觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、學(xué)習(xí)制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本。
2、學(xué)會使用顯微鏡觀察洋蔥表皮，用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細(xì)胞。
3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)：
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)難點(diǎn)：
正確使用顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：
分組實(shí)驗(yàn)器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實(shí)驗(yàn)過程：
一、導(dǎo)入課題
出示洋蔥。問：如果從它的內(nèi)表皮上揭下一塊，用顯微鏡來觀察能看到些什么呢？（板書課題）
二、制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本的方法與步驟。
（1）在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水；
�。�2）用小刀在洋蔥鱗葉片內(nèi)壁劃一個“井”字，用鑷子取下“井”中洋蔥內(nèi)表皮放到載玻片的水滴中央，注意標(biāo)本要平展開，不能折疊；
�。�3）用蓋玻片傾斜著蓋到標(biāo)本上面，放蓋玻片時，先放一端，再慢慢放下另一端，注意不要有氣泡。如水不足，可沿蓋玻片邊緣滴加；若水分過多，可用吸水紙吸掉；
（4）從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒，并把玻片微微傾斜，再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水；
�。�5）洋蔥表皮玻片標(biāo)本做成可進(jìn)行觀察。
2、學(xué)生以組為單位自制玻片標(biāo)本（最好制三份裝片，便于下面的對比觀察），教師巡視指導(dǎo)（教育學(xué)生注意安全）。
三、觀察洋蔥表皮細(xì)胞
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫在科學(xué)記錄本上。
2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫到科學(xué)記錄本上。
3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么？它們有何不同？
4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
（1）、出示顯微鏡，引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識顯微鏡，簡介各部分的名稱、功能及使用方法，學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
�。�2）、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。（師操作演示：安放――對光――上片――調(diào)焦――觀察。生一步步跟著操作。）
�。�3）、學(xué)生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細(xì)胞。教師巡視指導(dǎo)，各組的實(shí)驗(yàn)組長監(jiān)督組員操作是否規(guī)范，要求每個人都要操作、都要觀察，并將觀察結(jié)果進(jìn)行交流。組長將大家在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)畫到科學(xué)記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)。
�。�1）各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現(xiàn)。
（2）各組將所畫的觀察結(jié)果向全班展示。
（3）交流討論評價。
6、師小結(jié)：我們發(fā)現(xiàn)放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細(xì)節(jié)更多，更清楚。我們發(fā)現(xiàn)洋蔥表皮是由一個個比較規(guī)則的多邊形組成的，而且大多呈長方形，外為細(xì)胞壁，內(nèi)為無色細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結(jié)構(gòu)，就是洋蔥的細(xì)胞。（師一邊描述一邊畫洋蔥細(xì)胞簡圖）
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
回收實(shí)驗(yàn)器材，整理實(shí)驗(yàn)桌。
生物實(shí)驗(yàn)報告6
實(shí)驗(yàn): 練 習(xí) 使 用 顯 微 鏡
目的要求:
1、練習(xí)使用顯微鏡，學(xué)會規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)?biāo)本移動到視野中央，并看到清晰的圖象。
材料用具：
顯微鏡、e字玻片、動植物永久玻片、擦鏡紙、紗布
方法和步驟:
一、對照圖示認(rèn)識顯微鏡，識別顯微鏡的結(jié)構(gòu)及各部分的作用。
二、練習(xí)使用顯微鏡
1、取鏡和安放
右手握住鏡臂，左手托住鏡座。 把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺上，略偏左（顯微鏡放在距實(shí)驗(yàn)臺邊緣7厘米左右處）。安裝好目鏡和物鏡。
2、對光
轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。 把一個較大的光圈對準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開，便于畫圖)。轉(zhuǎn)動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡，可以看到白亮的視野。
3、放置玻片標(biāo)本
4、觀察 (先低后高)
把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對通光孔的中心。 轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止（眼 睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標(biāo)本）。 左眼向目鏡內(nèi)看，同時反方向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
5、收放
注意事項(xiàng)
1、注意安全，不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。
2、材料對準(zhǔn)通光孔，用壓片夾將玻片壓好。
3、下降鏡筒時，不要注視目鏡，一定要注視物鏡，以免損壞玻片標(biāo)本和物鏡頭。
4、取下玻片標(biāo)本時要小心;
5、實(shí)驗(yàn)完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，把兩個物鏡偏到兩旁， 1
并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，送回原處。 思考回答：
1、在進(jìn)行低倍鏡觀察時，使鏡筒下降至接近玻片的過程中，眼睛應(yīng)注視什么地方？為什么？
2、光線較暗時，應(yīng)選用反光鏡的平面還是凹面？
3、怎樣計算出視眼中的圖像的放大倍數(shù)？
4、若視眼中“e”位于左上方，怎樣操作才能將其移到視眼中央？
生物實(shí)驗(yàn)報告7
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 學(xué)會提取和分離葉綠體中色素的方法。
2. 比較、觀察葉綠體中四種色素：理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系
二、實(shí)驗(yàn)原理
光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機(jī)溶劑
中。故要提取色素，要破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，破壞葉綠體膜，使基粒片層結(jié)構(gòu)直接與有機(jī)溶劑接
觸，使色素溶解在有機(jī)溶劑中。
葉綠體中的色素有四種，不同色素在層析液(脂溶性強(qiáng)的有機(jī)溶劑)中的溶解度不同，
因而隨層析液的擴(kuò)散速度也不同。
三、材料用具
取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養(yǎng)皿、毛細(xì)吸管、量筒、有機(jī)溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。
四、實(shí)驗(yàn)過程（見書Ｐ54）
1.提取色素：
2.制備濾紙條：
3.色素分離，紙層析法。（不要讓濾液細(xì)線觸及層析液）
4.觀察：
層析后，取出濾紙，在通風(fēng)處吹干。觀察濾紙條上出現(xiàn)色素帶的數(shù)目、顏色、位置和寬窄。結(jié)果是：4條色素帶從上而下依次是：胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍(lán)綠色)、葉綠素b(黃綠色)。
五、討論
1.濾紙條上的濾液細(xì)線為什么不能接觸到層析液？
2．提取和分離葉綠體中色素的關(guān)鍵是什么？
生物實(shí)驗(yàn)報告8
實(shí)驗(yàn)一:練習(xí)使用顯微鏡
目的要求:
1.練習(xí)使用顯微鏡，學(xué)會規(guī)范的操作方法。
2.能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3.能夠?qū)?biāo)本移動到視野中央，并看到清晰的圖象。
材料用具:顯微鏡，寫有“上”字的玻片，動、植物玻片標(biāo)本，擦鏡紙，紗布。
方法步驟
1.右手握住鏡臂，左手托住鏡座。
2．把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺距邊緣7厘米左右處，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
3．動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔。
4．把一個較大的光圈對準(zhǔn)通光孔。一只眼注視目鏡內(nèi)，另一只眼睜開。轉(zhuǎn)動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。
5.把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對通光孔的中心。
6．轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止此時眼睛一定要看著物鏡）。
7．一只眼向目鏡內(nèi)看，同時逆時針方向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物象更加清晰。
8．練習(xí)將所觀察的標(biāo)本移到視野中央，先移動一下標(biāo)本，物象朝相反的方向移動。說明了在目鏡中看到的像是真實(shí)的像的倒像。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。如需擦拭目鏡和物鏡，請用擦鏡紙。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，把兩個物鏡偏到兩旁，并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，送回原處。
討 論
1.顯微鏡的使用步驟有哪些？
答：1、取鏡和安放2、對光3、觀察（放片、調(diào)焦） 4、清潔與收鏡
2.使用顯微鏡觀察時，為什么在下降鏡筒時眼睛要注視物鏡？
答：物鏡把載玻片壓碎，也容易劃傷物鏡。
3.在顯微鏡下能看清寫在不透明紙上的“上”字嗎？
答：看不到，不透明的紙會阻擋光線從物鏡進(jìn)入光筒再從目鏡射出，所以可能什么也看不見。
實(shí)驗(yàn)時間：20xx.9.15
實(shí)驗(yàn)二:觀察植物細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
1、制作植物細(xì)胞的臨時裝片,學(xué)習(xí)制作臨時裝片的基本辦法.
2、認(rèn)識植物細(xì)胞等基本結(jié)構(gòu). 3、練習(xí)畫細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖.
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：
分組實(shí)驗(yàn)器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本
1、用潔凈地紗布把載玻片擦拭干凈。
2、把載玻片放在實(shí)驗(yàn)臺上，用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。
制作臨時裝片
3、用鑷子從洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)撕取一小塊透明在膜——內(nèi)表皮。把撕下的內(nèi)表皮浸入載玻片的水滴中，用鑷子把它展平。
4、用鑷子夾起蓋玻片，是它的一邊先解除4載玻片上的水滴，然后緩緩地放下，蓋在要觀察的材料上，這樣才能避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡而影響觀察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側(cè)。
6、用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引，使染液浸潤標(biāo)本的全部。
三、觀察洋蔥表皮細(xì)胞
利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞，先用低倍鏡下觀察，再在高倍鏡下觀察。
四、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞圖。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
回收實(shí)驗(yàn)器材，整理實(shí)驗(yàn)桌。
實(shí)驗(yàn)時間： 20xx.9.22
實(shí)驗(yàn)三：觀察人體口腔上皮細(xì)胞
目的要求：
1. 制作和觀察人體口腔上皮細(xì)胞的臨時裝片
2. 認(rèn)識人體口腔上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)
3. 熟練畫細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖
材料用具：
顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽 方法步驟
(一) 制作人口腔上皮細(xì)胞的臨時裝片
1. 用紗布擦凈載玻片、蓋玻片（很薄，應(yīng)輕擦）
2. 在載玻片中央滴一滴生理鹽水（0.9%），說明：為什么用0.9%的生理鹽水，觀
察洋蔥表皮裝片用清水，都是為了讓細(xì)胞所處的環(huán)境和它們所生活的環(huán)境相同，
不至于脹破或變形，使細(xì)胞保持原狀。
3. 漱凈口。目的：將口腔的飯粒清除，以保證所取的細(xì)胞純度。
4. 用牙簽在口腔內(nèi)壁輕劃幾下，將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中，盡量涂均勻。
5. 蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片，使它的一側(cè)先接觸載玻片的水滴，然后慢慢放
平（注意：避免產(chǎn)生氣泡）。
6. 染色。①在蓋玻片一側(cè)滴加稀碘液，②用吸水紙在蓋玻片另一側(cè)吸引，使染液
浸潤標(biāo)本的全部。
(二) 用顯微鏡觀察。
使用顯微鏡①安放②對光③放置玻片標(biāo)本，調(diào)節(jié)焦距，用眼觀察，在視野中會看到被染成桔黃色的上皮細(xì)胞.
（三）繪圖：
人體口腔上皮細(xì)胞模式圖
�。ㄋ模┱恚呵鍧嵅Ｆ�，廢物放在指定位置。
歸納討論：人的口腔上皮細(xì)胞有哪些基本結(jié)構(gòu)，植物細(xì)胞和動物細(xì)胞相同和不同之處。 答：人的口腔上皮細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核；植物細(xì)胞與動物細(xì)胞相比，細(xì)胞壁、葉綠體和液泡是植物細(xì)胞特有的。
實(shí)驗(yàn)時間： 20xx.9.27
實(shí)驗(yàn)四：觀察人體的基本組織
目的要求：
1．觀察人體基本組織的永久切片，認(rèn)識人體的四種基本組織；
2．描述同一種組織中細(xì)胞的共同特點(diǎn)；
3．描述不同組織中細(xì)胞形態(tài)上的不同之處；
4．根據(jù)觀察，概述組織的共同特點(diǎn)，形成組織的概念。
材料器具：
顯微鏡；扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片；橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片；骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結(jié)締組織玻片；神經(jīng)組織的玻片。
方法步驟：
1．根據(jù)教師提供的玻片，逐個在顯微鏡低倍鏡下認(rèn)真觀察，注意細(xì)胞的形態(tài)特征和細(xì)胞間的聯(lián)系特點(diǎn)。
2．根據(jù)觀察，同組間的同學(xué)互相討論，認(rèn)真填寫下表。
主要分布位組織類型 主要特征 功能 舉例 置
皮膚，消化 皮膚，小腸腺上皮組織 排列緊密形成表面 保護(hù)，分泌 道 上皮
四肢，軀 骨骼肌，平滑肌肉組織 呈長條狀緊密排列 干，內(nèi)臟器 收縮，舒張 肌 官
支持，連接， 軟骨，軟組結(jié)締組織 細(xì)胞之間間隙較大 全身各處 保護(hù)，營養(yǎng) 織，血液
產(chǎn)生傳導(dǎo)興神經(jīng)組織 形狀獨(dú)特呈發(fā)散狀 神經(jīng)系統(tǒng) 神經(jīng)纖維 奮
實(shí)驗(yàn)時間：20xx.10.26
實(shí)驗(yàn)五：觀察葉片結(jié)構(gòu)
目的要求:
1,練習(xí)徒手切片.
2認(rèn)識葉片的結(jié)構(gòu).
3畫葉片的表皮細(xì)胞和保衛(wèi)細(xì)胞圖.
材料用具:
新鮮葉片,顯微鏡,雙面刀片,鑷子,載玻片,蓋玻片,葉片的永久切片,盛有清水的培養(yǎng)皿,滴管,吸水紙,碘液,紗布,毛筆,小木板.
方法步驟:
一,練習(xí)徒手切片,制作葉片橫切片的臨時切片
1,把新鮮的葉片平放在小木板上.
2,右手捏緊并排的兩片刀片,沿著圖中虛線的方向,迅速切割.
3,刀片的夾縫中春游切下的薄片.要多切幾次(每且一次，刀片要咱蘸一下稅）。把切下的薄片放入水中。
4，用毛筆蘸出最薄的一片，制成臨時切片。
二，觀察葉片的結(jié)構(gòu)
1用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時切片，再觀察葉片的永久橫切片。
2在顯微鏡下分清業(yè)的表皮，葉肉和葉脈。
三，觀察葉片的下表皮
1用鑷子撕下一小塊葉片（如蠶豆葉片的下表皮，制成臨時裝片。
2 用顯微鏡進(jìn)行觀察，看一看葉片下表皮的細(xì)胞是什么樣子的，下表皮上有沒有氣孔？下表皮氣孔多于上表皮。
四，實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
討論：保衛(wèi)細(xì)胞和它周圍的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有什么不同？保衛(wèi)細(xì)胞的這種結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對蒸騰作用有什么意義？
答：當(dāng)水分充足時,保衛(wèi)細(xì)胞膨脹張開,則氣孔張開,這時,蒸騰作用很強(qiáng)；當(dāng)水分不充足時,保衛(wèi)細(xì)胞收縮關(guān)閉,則氣孔關(guān)閉,這時,蒸騰作用變?nèi)酢１Ｐl(wèi)細(xì)胞能夠控制氣孔開關(guān),所以也就能起到促進(jìn)或減緩蒸騰作用的意義。
實(shí)驗(yàn)時間：20xx.12.5
生物實(shí)驗(yàn)報告9
實(shí)驗(yàn)生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基)，因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實(shí)驗(yàn)中，用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下：
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍(lán)色棕色磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物，這個反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。
3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實(shí)驗(yàn)過程(見書P18)
四、實(shí)驗(yàn)用品(見書P18)
五、注意
1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)，在加熱試管中的溶液時，應(yīng)該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者，以免試管內(nèi)溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么？
生物實(shí)驗(yàn)報告10
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 初步學(xué)會觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。
2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中，使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時，原生質(zhì)層就會與細(xì)胞壁逐漸分離開，也就是分升了質(zhì)壁分離當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中，整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài)，使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P60)
物理實(shí)驗(yàn)報告 ——化學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 ——生物實(shí)驗(yàn)報告 ——實(shí)驗(yàn)報告格式 ——實(shí)驗(yàn)報告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細(xì)胞浸潤在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細(xì)胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?
2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時，紅細(xì)胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?
3.畫一個細(xì)胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理，再經(jīng)過清水處理的細(xì)胞變化的一系列模式圖。
生物實(shí)驗(yàn)報告11
質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測
姓名：XXX學(xué)號：2011001400XX年級：20xx級生物基地班 實(shí)驗(yàn)日期：20xx年9月16日—30日組別：6組 同組者：XX
一、【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/strong>
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學(xué)習(xí)并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗(yàn)原理。
3、學(xué)習(xí)并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習(xí)并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實(shí)驗(yàn)原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒（Plasmid）是獨(dú)立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子，分布于細(xì)菌、放線菌、真菌以及一些動植物細(xì)胞中，但在細(xì)菌細(xì)胞中含量最多。細(xì)菌質(zhì)粒大小介于1～200Kb之間，是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類群，在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)它們利用宿主細(xì)胞的復(fù)制機(jī)構(gòu)合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個步驟：①培養(yǎng)細(xì)菌，使質(zhì)粒DNA大量擴(kuò)增；②收集和裂解細(xì)菌；③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括：堿裂解法：0。2molNaOH+1%SDS；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；SDS裂解法：10%SDS，一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗(yàn)選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細(xì)菌細(xì)胞中，染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來，但是兩者變性與復(fù)性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達(dá)12。0的堿性溶液中，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性；共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補(bǔ)鏈不完全分離。因?yàn)樗鼈冊谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。當(dāng)用pH值4。6的KAc（NaAc）高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時，變性的質(zhì)粒DNA可恢復(fù)原來的共價閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中；但染色體DNA不能復(fù)性，而是與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類似，乙醇沉淀
DNA的同時，也伴隨著RNA沉淀，可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
電泳（electrophoresis）是帶電物質(zhì)在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質(zhì)，它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發(fā)生移動，移動的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段，是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實(shí)驗(yàn)。
分子生物學(xué)中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構(gòu)型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進(jìn)行電泳，并能容納較大的DNA上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—D—吡喃半乳糖與3，6—脫水—L—吡喃半乳糖組成，相對分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段DNA（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定DNA的相對分子質(zhì)量，分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段，進(jìn)一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負(fù)電荷，在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素：樣品DNA分子的大小、DNA分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、【實(shí)驗(yàn)材料】
1、實(shí)驗(yàn)儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（Eppendorf管）、高速離心機(jī)、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號筆、手套等。
2、實(shí)驗(yàn)試劑
LB培養(yǎng)基，抗生素Ap（氨芐青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（PCI）混合液，預(yù)冷無水乙醇，TAE電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（EB），DNA相對分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)
配制LB液體培養(yǎng)基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配LB固體培養(yǎng)基；準(zhǔn)備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個 ，將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落，接種于20mlLB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行37℃振蕩過夜培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加Ap100ul
（100ug/ml），質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因，使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長。 過夜培養(yǎng)后菌體量大，雜質(zhì)較多，然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mlLB液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中加入Ap250ul，37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對數(shù)生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質(zhì)少，適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
�。�1）稱量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒?jié)M，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細(xì)胞。
�。�2）向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14。437g，則菌體質(zhì)量為106mg。
（3）洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液Ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液Ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細(xì)胞提前破裂，防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當(dāng)?shù)膒H。
�。�4） 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml（與溶液Ⅰ對應(yīng)），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細(xì)胞膜發(fā)生了從bilayer（雙層膜）結(jié)構(gòu)向micelle（微囊）結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細(xì)胞溶解。同時，強(qiáng)堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性；SDS為下一步沉淀做鋪墊。
�。�5）按比例加入冰預(yù)冷的溶液Ⅲ1。5ml（與溶液Ⅰ、Ⅱ?qū)?yīng)），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物、細(xì)胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因?yàn)殚L時間的堿性條件會打斷基因組DNA，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質(zhì)粒DNA復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側(cè)，用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學(xué)反應(yīng)，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負(fù)電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
�。�7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。
�。�8）以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標(biāo)記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色，隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質(zhì)粒，要在離心管上標(biāo)記質(zhì)粒所在位置。
（9）將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液，為DNA提供穩(wěn)定的生理狀態(tài)，呈弱堿性，有利于保護(hù)堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑，抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
�。�1）Eppendorf管中加入RNase A（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h
（2）將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）Tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的，顯黃色。苯
酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產(chǎn)生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質(zhì)。
�。�3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強(qiáng)的蛋白變性劑，但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會影響DNA的酶切，它本身易被氧化，會損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質(zhì)粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫，有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質(zhì)的存在。
�。�4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中，得上清液400ul。
�。�5）向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。
�。�6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到DNA沉淀，為白色。
�。�7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。
�。�8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測
�。�1）稱取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標(biāo)好液面位置，加入40ml的1×TAE電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補(bǔ)充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。
（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×TAE 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。
�。�3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍(lán)色）的移動。
�。�4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色，完全浸泡約5min。
�。�5）凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項(xiàng)】
�。�1）滴加溶液II時，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動作要快，因?yàn)閺?qiáng)堿在溶液中停留時間不能過長，否則會破壞質(zhì)粒DNA。
（2）加入溶液III后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液III中和強(qiáng)堿使質(zhì)粒復(fù)性，不可劇烈震蕩， 防止染色體DNA斷裂，應(yīng)該上下顛倒離心管，使其混勻。
生物實(shí)驗(yàn)報告12
一、實(shí)驗(yàn)名稱：
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞
二、實(shí)驗(yàn)材料：
顯微鏡、洋蔥表皮細(xì)胞切片，及其他細(xì)胞裝片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟：
1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著光放在實(shí)驗(yàn)臺上。
2、對光：轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔。
3、調(diào)節(jié)載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見亮的光圈。
4、觀察：調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標(biāo)本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內(nèi)看，同時轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋等，直到看清切片上的細(xì)胞為止，最后整理器材。
四、使用注意事項(xiàng)：
1、取送顯微鏡時，應(yīng)右手握住鏡臂,左手托住鏡座，輕拿輕放。
2、鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實(shí)驗(yàn)報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。
3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標(biāo)本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時，切勿使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓壞標(biāo)本，損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標(biāo)本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。
五、實(shí)驗(yàn)原理：
利用教學(xué)顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
六、創(chuàng)新點(diǎn)：
在實(shí)驗(yàn)過程中為學(xué)生提供多種細(xì)胞裝片，以供學(xué)生操作、觀察，增加了學(xué)生動手實(shí)驗(yàn)的時間，使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)歷調(diào)節(jié)顯微鏡的焦距的過程，從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。
生物實(shí)驗(yàn)報告13
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、通過對原核和真核各種形態(tài)細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察，了解細(xì)胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu)；
2、學(xué)習(xí)顯微測量的方法，對細(xì)胞的大小有一直觀認(rèn)識。
二、實(shí)驗(yàn)材料和儀器：
小白鼠肝細(xì)胞切片；雞血紅細(xì)胞；蠶豆葉片橫切片；
普通光學(xué)顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟：
(一)細(xì)胞形態(tài)觀察
l、動物細(xì)胞的觀察
�。�1）人肝細(xì)胞切片：在顯微鏡下仔細(xì)觀察肝細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造。
�。�2）雞血細(xì)胞涂片的觀察：觀察血細(xì)胞的組成；紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細(xì)胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。
�。ǘ┘�(xì)胞的大小和測量
1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動鏡臺測微尺和轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉(zhuǎn)動目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數(shù)。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：
鏡臺測微尺的格數(shù)
目鏡測微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10
目鏡測微尺的格數(shù)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24
2、細(xì)胞大小的測量：
五、作業(yè)與思考：
1、血細(xì)胞按含量高低，主要含有：紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板。
白細(xì)胞最大，紅細(xì)胞次之，血小板最小。紅細(xì)胞：主要的功能是運(yùn)送氧。 白細(xì)胞：主要扮演了免疫的角色，當(dāng)病菌侵入人體時，白細(xì)胞能穿過毛細(xì)血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。細(xì)胞形態(tài)見下圖。
2、植物細(xì)胞一般比動物細(xì)胞大一些。形態(tài)圖見下。
3、在不同放大倍數(shù)下，測定的細(xì)胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數(shù)越大，在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大，而更容易測量準(zhǔn)確。
生物實(shí)驗(yàn)報告14
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、掌握顯示細(xì)胞中過氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。2.了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測方法
二、實(shí)驗(yàn)原理：
1、細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本，細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán)，進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物，因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的，無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下，遵循自身的程序，自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過程。
3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實(shí)驗(yàn)步驟：
細(xì)胞中過氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；
2、取骨髓細(xì)胞：用斷頸法處死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開股骨一端，用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中，摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上；
3、涂片：用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個方向涂布推開，室溫晾干；
4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘（以蓋滿涂片為宜）6、清水沖洗，番紅復(fù)染2min。
7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀察，后換高倍鏡下觀察（油鏡100×）
細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀察吉姆薩染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞
3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結(jié)果與分析：
1、根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個視野的統(tǒng)計，該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細(xì)胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化（吖啶橙染色）
五、思考題：
1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制
細(xì)胞凋亡是一個受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動自殺過程，其觸發(fā)因素多種多樣，包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對細(xì)胞凋亡的調(diào)控。
2、細(xì)胞凋亡的特征
凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細(xì)胞凋亡的方法
定性的研究方法：常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察（普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）
定量或半定量的研究方法：各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實(shí)驗(yàn)報告15
第十次實(shí)驗(yàn)分離產(chǎn)淀粉酶微生物
學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院
專業(yè)：生物科學(xué)類
年級：20xx級
姓名：
學(xué)號：1007040085
20xx年XX月XX日
實(shí)驗(yàn)十分離產(chǎn)淀粉酶的微生物
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、熟悉常用微生物培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）的配制方法。
2、學(xué)習(xí)各種無菌操作技術(shù)，并用此技術(shù)進(jìn)行為微生物稀釋分離、劃線分離接種。
3、用平板劃線法和稀釋涂布平板發(fā)分離微生物。
4、認(rèn)識為微生物存在的普遍性，體會無菌操作的重要性。
5、掌握分離產(chǎn)淀粉酶微生物的試驗(yàn)方法和步驟，了解產(chǎn)淀粉酶的微生物種類及形態(tài)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
土壤是微生物生活的大本營，是尋找和發(fā)現(xiàn)有重要應(yīng)用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類微生物數(shù)量不同，一般土壤中細(xì)菌數(shù)量最多，其次為放線菌和霉菌。一般在較干燥，偏堿性、有機(jī)質(zhì)豐富的土壤中放線苗數(shù)量較多；酵母菌在一般土壤中的數(shù)量較少，而在水果表皮、葡萄園、果園土中數(shù)量多些。本次實(shí)驗(yàn)從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的微生物，應(yīng)該取那些富含產(chǎn)淀粉酶的微生物的土樣。從復(fù)雜的微生物群體中獲得只含有一種或某一類型微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有
1、簡單單細(xì)胞挑取法
2、平板分離法和稀釋涂布平板法
此次實(shí)驗(yàn)采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結(jié)合，該方法操作簡單，普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括：
1)稀釋后的細(xì)胞懸液圖不在平板上可以分離得單個菌株
2)在適合于待分離微生物的生長條件（如營養(yǎng)、酸堿度、溫度與氧等）下培養(yǎng)微生物，或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長，而抑制其他微生物生長的環(huán)境，從而淘汰一些不需要的微生物。
3)微生物在固體培養(yǎng)基上生長形成的單個菌落可以是由一個細(xì)胞繁殖而成的集合體。因此可通過挑取單菌落而獲得純培養(yǎng)。獲得單菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等方法完成。
以淀粉作為惟一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)未分離細(xì)菌，能產(chǎn)淀粉酶的細(xì)菌能生長，且菌落周圍出現(xiàn)透明圈（淀粉不透明，被消化后變透明），則產(chǎn)淀粉酶微生物被分離出來。本實(shí)驗(yàn)采用透明圈檢驗(yàn)法檢測培養(yǎng)物中是否有產(chǎn)淀粉酶微生物的生長。
三、實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
1、器材：
培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、、天平、濾紙、pH試紙等。
2、試劑：
配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料（牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨）、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無菌水加20粒玻璃珠，作稀釋用等。
3、土樣：
取自貴州大學(xué)農(nóng)生樓后土壤10g，地下10cm左右。
四、實(shí)驗(yàn)步驟：
1、配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：
1）配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基400ml（用于11個平皿和7支試管斜面）牛肉膏0.5%…………………………………2g
蛋白胨1%……………………………………4g
NaCl0.5%…………………………………..2g
瓊脂2%……………………………………..8g
淀粉0.5%........................................2g
pH……………………………………7.0~7.2
�。�2）無菌水的制備
分別取9ml蒸餾水加入5支試管中，加塞后用報紙包扎捆綁，放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中，同樣的操作，滅菌備用。
�。�3）器皿的準(zhǔn)備
將刻度吸管用報紙包扎，培養(yǎng)皿裝入專用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。
2）倒11個平板和7支試管斜面，包扎，0.1Mp、121℃、滅菌30min.
2、制備土壤稀釋液：
稱取土樣10g，放入盛有250ml無菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中，振蕩搖勻10min使土和水充分混合，然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml（此操作要求無菌操作），加入另一盛有9ml無菌水的試管中，混合均勻，以此類推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。
3、涂布培養(yǎng)：
0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養(yǎng)的對象，將其分別涂布在3個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，共6個培養(yǎng)基，標(biāo)號，37°C溫箱培養(yǎng)48h。
4、選取目的菌株：
兩天后對土壤溶液的微生物培養(yǎng)基進(jìn)行觀察，并取兩個菌落形態(tài)完全一致的分散的單個菌落，對其中一個噴灑盧戈氏碘液，觀察其菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈，如果出現(xiàn)透明圈說明此菌株產(chǎn)淀粉酶，是目的菌株，記錄細(xì)菌明顯的性狀。
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