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生物實驗報告精選15篇
在人們越來越注重自身素養(yǎng)的今天,大家逐漸認識到報告的重要性,要注意報告在寫作時具有一定的格式。那么什么樣的報告才是有效的呢?以下是小編整理的生物實驗報告,希望對大家有所幫助。
生物實驗報告1
一、實驗目的:
1、掌握顯示細胞中過氧化物酶反應的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學意義
3、掌握凋亡細胞的形態(tài)學檢測方法
二、實驗原理:
1、細胞內(nèi)的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標本,細胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍,進而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產(chǎn)物藍色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。
3、凋亡細胞形態(tài)學特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細胞凋亡形態(tài)學特征進行顯微觀察是檢測細胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實驗步驟:
細胞中過氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;
2、取骨髓細胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中,摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上;
3、涂片:用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開,室溫晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應6分鐘(以蓋滿涂片為宜)6、清水沖洗,番紅復染2min。
7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)
細胞凋亡的形態(tài)學檢測與觀察吉姆薩染色:
1、取細胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:
1、取細胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結(jié)果與分析:
1、根據(jù)隨機選擇的幾個視野的統(tǒng)計,該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)
五、思考題:
1、細胞凋亡的調(diào)控機制
細胞凋亡是一個受基因調(diào)控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動自殺過程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細胞內(nèi)誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調(diào)控。
2、細胞凋亡的特征
凋亡細胞形態(tài)學特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細胞凋亡的方法
定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學觀察(普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)
定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實驗報告2
實驗名稱:
觀察洋蔥表皮細胞。
實驗目的:
1、學習制作洋蔥表皮玻片標本。
2、學會使用顯微鏡觀察洋蔥表皮,用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細胞。
3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實驗重點:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
實驗難點:
正確使用顯微鏡。
實驗準備:
分組實驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實驗過程:
一、導入課題
出示洋蔥。問:如果從它的內(nèi)表皮上揭下一塊,用顯微鏡來觀察能看到些什么呢?(板書課題)
二、制作洋蔥表皮玻片標本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。
(1)在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;
(2)用小刀在洋蔥鱗葉片內(nèi)壁劃一個“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內(nèi)表皮放到載玻片的水滴中央,注意標本要平展開,不能折疊;
。3)用蓋玻片傾斜著蓋到標本上面,放蓋玻片時,先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過多,可用吸水紙吸掉;
(4)從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;
。5)洋蔥表皮玻片標本做成可進行觀察。
2、學生以組為單位自制玻片標本(最好制三份裝片,便于下面的對比觀察),教師巡視指導(教育學生注意安全)。
三、觀察洋蔥表皮細胞
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫在科學記錄本上。
2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫到科學記錄本上。
3、學生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么?它們有何不同?
4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
。1)、出示顯微鏡,引導學生認識顯微鏡,簡介各部分的名稱、功能及使用方法,學生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
。2)、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。(師操作演示:安放――對光――上片――調(diào)焦――觀察。生一步步跟著操作。)
。3)、學生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細胞。教師巡視指導,各組的實驗組長監(jiān)督組員操作是否規(guī)范,要求每個人都要操作、都要觀察,并將觀察結(jié)果進行交流。組長將大家在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)畫到科學記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)。
(1)各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現(xiàn)。
。2)各組將所畫的觀察結(jié)果向全班展示。
。3)交流討論評價。
6、師小結(jié):我們發(fā)現(xiàn)放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節(jié)更多,更清楚。我們發(fā)現(xiàn)洋蔥表皮是由一個個比較規(guī)則的多邊形組成的,而且大多呈長方形,外為細胞壁,內(nèi)為無色細胞質(zhì)和細胞核。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結(jié)構(gòu),就是洋蔥的細胞。(師一邊描述一邊畫洋蔥細胞簡圖)
四、實驗結(jié)束。
回收實驗器材,整理實驗桌。
生物實驗報告3
實驗: 練 習 使 用 顯 微 鏡
目的要求:
1、練習使用顯微鏡,學會規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)吮疽苿拥揭曇爸醒,并看到清晰的圖象。
材料用具:
顯微鏡、e字玻片、動植物永久玻片、擦鏡紙、紗布
方法和步驟:
一、對照圖示認識顯微鏡,識別顯微鏡的結(jié)構(gòu)及各部分的作用。
二、練習使用顯微鏡
1、取鏡和安放
右手握住鏡臂,左手托住鏡座。 把顯微鏡放在實驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
2、對光
轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。 把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開,便于畫圖)。轉(zhuǎn)動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡,可以看到白亮的視野。
3、放置玻片標本
4、觀察 (先低后高)
把所要觀察的玻片標本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。 轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼 睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。 左眼向目鏡內(nèi)看,同時反方向轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
5、收放
注意事項
1、注意安全,不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。
2、材料對準通光孔,用壓片夾將玻片壓好。
3、下降鏡筒時,不要注視目鏡,一定要注視物鏡,以免損壞玻片標本和物鏡頭。
4、取下玻片標本時要小心;
5、實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,把兩個物鏡偏到兩旁, 1
并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進鏡箱里,送回原處。 思考回答:
1、在進行低倍鏡觀察時,使鏡筒下降至接近玻片的過程中,眼睛應注視什么地方?為什么?
2、光線較暗時,應選用反光鏡的平面還是凹面?
3、怎樣計算出視眼中的圖像的放大倍數(shù)?
4、若視眼中“e”位于左上方,怎樣操作才能將其移到視眼中央?
生物實驗報告4
一、實驗名稱:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞
二、實驗材料:
顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片,及其他細胞裝片。
三、實驗步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著光放在實驗臺上。
2、對光:轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準通光孔。
3、調(diào)節(jié)載物臺下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見亮的光圈。
4、觀察:調(diào)節(jié)粗準焦螺旋,把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺上,用壓片夾夾住,標本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內(nèi)看,同時轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋等,直到看清切片上的細胞為止,最后整理器材。
四、使用注意事項:
1、取送顯微鏡時,應右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時,坐姿端正,一般用左眼觀察物象,用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。
3、切忌一面從目鏡進行觀察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時,切勿使用粗調(diào)節(jié)器,以免壓壞標本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開鏡頭后再取出玻片標本,以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。
五、實驗原理:
利用教學顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。
六、創(chuàng)新點:
在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片,以供學生操作、觀察,增加了學生動手實驗的時間,使學生在實驗中經(jīng)歷調(diào)節(jié)顯微鏡的焦距的過程,從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。
生物實驗報告5
一、實驗目的初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實驗原理
1.還原糖的鑒定原理
生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實驗中,用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下:CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色 棕色 磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理
鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。
3.脂肪的鑒定原理
脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實驗過程(見書P18)
四、實驗用品(見書P18)
五、注意
關(guān)于鑒定還原糖的實驗,在加熱試管中的溶液時,應該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時試管口不要朝向?qū)嶒炚,以免試管?nèi)溶液沸騰時沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B六、討論鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么?
生物實驗報告6
質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測
姓名:XXX學號:2011001400XX年級:20xx級生物基地班 實驗日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX
一、【實驗目的】
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學習并掌握凝膠電泳進行DNA的分離純化的實驗原理。
3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實驗原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒(Plasmid)是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子,分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中,但在細菌細胞中含量最多。細菌質(zhì)粒大小介于1~200Kb之間,是應用最多的質(zhì)粒類群,在細菌細胞內(nèi)它們利用宿主細胞的復制機構(gòu)合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個步驟:①培養(yǎng)細菌,使質(zhì)粒DNA大量擴增;②收集和裂解細菌;③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質(zhì)粒大量提取。在實際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點以及質(zhì)粒DNA的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中,染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來,但是兩者變性與復性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性;共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時,變性的質(zhì)粒DNA可恢復原來的共價閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復性,而是與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心,與復性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA,可用無水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類似,乙醇沉淀
DNA的同時,也伴隨著RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質(zhì)在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質(zhì),它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中,其中的電離子會發(fā)生移動,移動的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異,就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話,這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實驗。
分子生物學中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構(gòu)型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高,長度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行DNA序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測定DNA的相對分子質(zhì)量,分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段,進一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負電荷,在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、【實驗材料】
1、實驗儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號筆、手套等。
2、實驗試劑
LB培養(yǎng)基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預冷無水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對分子質(zhì)量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實驗步驟】
1、準備實驗
配制LB液體培養(yǎng)基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養(yǎng)基;準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個 ,將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養(yǎng)基中進行37℃振蕩過夜培養(yǎng),培養(yǎng)基中加Ap100ul
(100ug/ml),質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長。 過夜培養(yǎng)后菌體量大,雜質(zhì)較多,然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mlLB液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對數(shù)生長期后期,生長速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質(zhì)少,適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
。1)稱量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒?jié)M,液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細胞。
(2)向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱重得14。437g,則菌體質(zhì)量為106mg。
。3)洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細胞提前破裂,防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當?shù)膒H。
(4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對應),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發(fā)生了從bilayer(雙層膜)結(jié)構(gòu)向micelle(微囊)結(jié)構(gòu)的相變化導致細胞溶解。同時,強堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
。5)按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ?qū),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因為長時間的堿性條件會打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質(zhì)粒DNA復性。反應形成的高鹽環(huán)境進一步加速了沉淀。
(6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側(cè),用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
。7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
。8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色,隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質(zhì)粒,要在離心管上標記質(zhì)粒所在位置。
。9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩(wěn)定的生理狀態(tài),呈弱堿性,有利于保護堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
(1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h
。2)將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的,顯黃色。苯
酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無色,在中間產(chǎn)生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質(zhì)。
。3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑,但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質(zhì)粒中的脂類,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫,有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質(zhì)的存在。
。4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
。5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
。6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
。7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
(8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測
(1)稱取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
(2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
(3)電泳1h,觀察溴酚蘭的帶(藍色)的移動。
(4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進EB溶液中進行染色,完全浸泡約5min。
(5)凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項】
。1)滴加溶液II時,要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動作要快,因為強堿在溶液中停留時間不能過長,否則會破壞質(zhì)粒DNA。
。2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強堿使質(zhì)粒復性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實驗報告7
一、實驗目的:
1、通過對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學顯微鏡觀察,了解細胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu);
2、學習顯微測量的方法,對細胞的大小有一直觀認識。
二、實驗材料和儀器:
小白鼠肝細胞切片;雞血紅細胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實驗步驟:
(一)細胞形態(tài)觀察
l、動物細胞的觀察
(1)人肝細胞切片:在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態(tài)構(gòu)造。
(2)雞血細胞涂片的觀察:觀察血細胞的組成;紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點。
2、植物細胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結(jié)構(gòu)。
。ǘ┘毎拇笮『蜏y量
1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動鏡臺測微尺和轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉(zhuǎn)動目鏡上透鏡進行調(diào)焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數(shù)。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:
鏡臺測微尺的格數(shù)
目鏡測微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10
目鏡測微尺的格數(shù)
四、實驗結(jié)果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24
2、細胞大小的測量:
五、作業(yè)與思考:
1、血細胞按含量高低,主要含有:紅細胞,白細胞,血小板。
白細胞最大,紅細胞次之,血小板最小。紅細胞:主要的功能是運送氧。 白細胞:主要扮演了免疫的角色,當病菌侵入人體時,白細胞能穿過毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過程中起著重要作用。細胞形態(tài)見下圖。
2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態(tài)圖見下。
3、在不同放大倍數(shù)下,測定的細胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數(shù)越大,在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大,而更容易測量準確。
生物實驗報告8
一、實驗名稱
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動
二、實驗目的
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
三、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴毎械募毎|(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),觀察細胞質(zhì)的流動,可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動做為標志。
四、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
五、實驗過程(見書p30)
1、制作蘚類葉片的臨時裝片
2、用顯微鏡觀察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時裝片
4、用顯微鏡觀察細胞質(zhì)流動
六、討論
1、細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動,為什么?
2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3、植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動有什么意義?
4、用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。
生物實驗報告9
一、實驗目的
1.初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。
2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化學反應。
二、實驗原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖,還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分數(shù)為2%的新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分數(shù)為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分數(shù)為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實驗過程
(見書P47)
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
。.兩支試管保溫時,為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?
3.如果2號試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實驗報告10
實驗日期: 年月 日
組長: 組員:
一、實驗要求
1、練習使用顯微鏡,學習規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)⒉F瑯吮疽苿拥揭曇爸醒耄⒖吹角逦膱D像。
二、實驗原理
三、材料用具
顯微鏡,寫有“上”字的玻片,動物、植物玻片標本,擦鏡紙,紗布。
四、方法與步驟
。ㄒ唬┤$R和安放
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座
2、把顯微鏡放在實驗臺上,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
(二)對光
3、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。
4、把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開,便于以后同時畫圖)。轉(zhuǎn)動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡,以看到白亮的視野。
。ㄈ┯^察
5、把所要觀察的玻片標本(也可以用印有“e”字的薄紙片制成)放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6、轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。
7、左眼向目鏡內(nèi)看,同時反方向轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項:
1、實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,把兩個物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進鏡箱里,
生物實驗報告11
實驗生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定
一、實驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實驗原理
1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實驗中,用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/ml的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的cu(oh)2沉淀。cu(oh)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的cu2o沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下:
ch2oh—(choh)4—cho+2cu(oh)2→ch2oh—(choh)4—cooh+cu2o↓+2h2o
用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液(a)和質(zhì)量濃度為0.01g/ml(b)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(naoh)中,雙縮脲(h2noc—nh—conh2)能與cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。
3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實驗過程(見書p18)
四、實驗用品(見書p18)
五、注意
1.關(guān)于鑒定還原糖的實驗,在加熱試管中的溶液時,應該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時試管口不要朝向?qū)嶒炚,以免試管?nèi)溶液沸騰時沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲a,再加雙縮脲b
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么?
生物實驗報告12
一、 實驗室規(guī)則
1.實驗前應認真預習實驗指導,明確實驗目的和要求,寫出預實驗報告。
2.進入實驗室必須穿白大衣。嚴格遵守實驗課紀律,不得無故遲到或早退。不得高聲說話。嚴禁拿實驗器具開玩笑。實驗室內(nèi)禁止吸煙、用餐。
3.嚴格按操作規(guī)程進行實驗。實驗過程中自己不能解決或決定的問題,切勿盲目處理,應及時請教指導老師。
4.嚴格按操作規(guī)程使用儀器,凡不熟悉操作方法的儀器不得隨意動用,對貴重的精密儀器必須先熟知使用方法,才能開始使用;儀器發(fā)生故障,應立即關(guān)閉電源并報告老師,不得擅自拆修。
5.取用試劑時必須“隨開隨蓋”,“蓋隨瓶走”,即用畢立即蓋好放回原處,切忌“張冠李戴”,避免污染。
6.愛護公物,節(jié)約水、電、試劑,遵守損壞儀器報告、登記、賠償制度。
7.注意水、電、試劑的使用安全。使用易燃易爆物品時應遠離火源。用試管加熱時,管口不準對人。嚴防強酸強堿及有毒物質(zhì)吸入口內(nèi)或濺到別人身上。任何時候不得將強酸、強堿、高溫、有毒物質(zhì)拋灑在實驗臺上。
8.廢紙及其它固體廢物嚴禁倒入水槽,應倒到垃圾桶內(nèi)。廢棄液體如為強酸強堿,必須事先用水稀釋,方可倒入水槽內(nèi),并放水沖走。
9.以實事求是的科學態(tài)度如實記錄實驗結(jié)果,仔細分析,做出客觀結(jié)論。
實驗失敗,須認真查找原因,而不能任意涂改實驗結(jié)果。實驗完畢,認真書寫實驗報告,按時上交。
10.實驗完畢,個人應將試劑、儀器器材擺放整齊,用過的玻璃器皿應刷洗干凈歸置好,方可離開實驗室。值日生則要認真負責整個實驗室的清潔和整理,保持實驗整潔衛(wèi)生。離開實驗室前檢查電源、水源和門窗的安全等,并嚴格執(zhí)行值日生登記制度。
二、實驗報告的基本要求
實驗報告通過分析總結(jié)實驗的結(jié)果和問題,加深對有關(guān)理論和技術(shù)的理解與掌握,提高分析、綜合、概括問題的能力,同時也是學習撰寫研究論文的過程。
1.實驗報告應該在專用的生化實驗報告本上、按上述格式要求書寫。
2.實驗報告的前三部分①實驗原理、②實驗材料(包括實驗樣品、主要試劑、主要儀器與器材)、③實驗步驟(包括實驗流程與操作步驟)要求在實驗課前預習后撰寫,作為實驗預習報告的內(nèi)容。預習時也要考慮并設(shè)計好相應實驗記錄的表格。
3.每項內(nèi)容的基本要求
(1)實驗原理:簡明扼要地寫出實驗的原理,涉及化學反應時用化學反應方程式表示。
。2)實驗材料:應包括各種來源的生物樣品及試劑和主要儀器。說明化學試劑時要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。試劑要標清所用的濃度。
。3)實驗步驟:描述要簡潔,不能照抄實驗講義,可以采用工藝流程圖的方式或自行設(shè)計的表格來表示,但對實驗條件和操作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)應寫清楚,以便他人重復。
。4)實驗記錄:包括主要實驗條件、實驗中觀察到的現(xiàn)象及實驗中的原始數(shù)據(jù)。
(5)結(jié)果(定量實驗包括計算):應把所得的實驗結(jié)果(如觀察現(xiàn)象)和數(shù)據(jù)進行整理、歸納、分析、對比,盡量用圖表的形式概括實驗的結(jié)果,如實驗組與對照組實驗結(jié)果的比較表等(有時對實驗結(jié)果還可附以必要的說明)。
。6)討論:不應是實驗結(jié)果的重述,而是以結(jié)果為基礎(chǔ)的邏輯推論。如對定性實驗,在分析實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上應有中肯的結(jié)論。還可以包括關(guān)于實驗方法、操作技術(shù)和有關(guān)實驗的一些問題,對實驗異常結(jié)果的分析和評論,對于實驗設(shè)計的認識、體會和建議,對實驗課的改進意見等。
(7)結(jié)論:一般實驗要有結(jié)論,結(jié)論要簡單扼要,說明本次實驗所獲得的結(jié)果。
三、實驗報告的評分標準(百分制)
1.實驗預習報告內(nèi)容(30分)
學生進入實驗室前應預習實驗,并書寫預習報告。實驗預習報告應包括以下三部分: ①實驗原理(10分):要求以自己的語言歸納要點;②實驗材料(5分):包括樣品、試劑及儀器。只列出主要儀器、試劑(常規(guī)材料不列);③實驗方法(15分):包括流程或路線、操作步驟,要以流程圖、表格式給出要點,簡明扼要。依據(jù)各部分內(nèi)容是否完整、清楚、簡明等,分以下三個等級給分。
優(yōu)秀:項目完整,能反映實驗者的加工、整理、提煉。
合格:較完整,有一定整理,但不夠精煉。
不合格:不完整、缺項,大段文字,完全照抄教材,記流水賬。
實驗預習報告不合格者,不允許進行實驗。該實驗應重新預約,待實驗室安排時間后方可進行實驗。
2.實驗記錄內(nèi)容(20分)
實驗記錄是實驗教學、科學研究的重要環(huán)節(jié)之一,必須培養(yǎng)嚴謹?shù)目茖W作風。
實驗記錄的主要內(nèi)容包括以下三方面:①主要實驗條件(如材料的來源、質(zhì)量;試劑的規(guī)格、用量、濃度;實驗時間、操作要點中的技巧、失誤等,以便總結(jié)實驗時進行核對和作為查找成敗原因的參考依據(jù));②實驗中觀察到的現(xiàn)象(如加入試劑后溶液顏色的變化);③原始實驗數(shù)據(jù):設(shè)計實驗數(shù)據(jù)表格(注意三線表格式),準確記錄實驗中測得的原始數(shù)據(jù)。記錄測量值時,要根據(jù)儀器的精確度準確記錄有效數(shù)字(如吸光值為0.050,不應寫成0.05),注意有效數(shù)字的位數(shù)。
實驗記錄應在實驗過程中書寫;應該用鋼筆或者圓珠筆記錄,不能用鉛筆。記錄不可擦抹和涂改,寫錯時可以準確劃去重記。記錄數(shù)據(jù)時請教師審核并簽名。
實驗記錄分以下三個等級給分。
優(yōu)秀:如實詳細地記錄了實驗條件、實驗中觀察到的現(xiàn)象、結(jié)果及實驗中的原始數(shù)據(jù)(如三次測定的吸光度值)等;實驗記錄用鋼筆或者圓珠筆記錄,沒有抹擦和涂改跡象。書寫準確,表格規(guī)范(三線表)。有教師的簽字審核。
合格:記錄了主要實驗條件,但不詳細、凌亂;實驗中觀察到的現(xiàn)象不細致;原始數(shù)據(jù)無涂改跡象,但不規(guī)范。有教師的簽字審核。
不合格:記錄不完整,有遺漏;原始數(shù)據(jù)有抹擦和涂改跡象、捏造數(shù)據(jù)(以0分計);圖、表格形式錯誤;用鉛筆記錄原始數(shù)據(jù);無教師的簽字審核。 若記錄的結(jié)果有懷疑、遺漏、丟失,必須重做實驗,培養(yǎng)嚴謹?shù)目茖W作風。
3.結(jié)果與討論(45分)
。1)數(shù)據(jù)處理(5分)
對實驗中所測得的一系列數(shù)值,要選擇合適的處理方法進行整理和分析。數(shù)據(jù)處理時,要根據(jù)計算公式正確書寫中間計算過程或推導過程及結(jié)果,得出最終實驗結(jié)果。要注意有效數(shù)字的位數(shù)、單位(國際單位制)。經(jīng)過統(tǒng)計處理的數(shù)據(jù)要以X〒SD表示?煞殖梢韵氯齻等級給分。
優(yōu)秀:處理方法合理,中間過程清楚,數(shù)據(jù)格式單位規(guī)范。
合格:處理方法較合理,有中間計算過程;數(shù)據(jù)格式單位較規(guī)范。
不合格:處理方法不當;無中間過程;有效數(shù)字的位數(shù)、單位不規(guī)范。
。2)結(jié)果(20分)
實驗結(jié)果部分應把所觀察到的現(xiàn)象和處理的最終數(shù)據(jù)進行歸納、分析、比對,以列表法或作圖法來表示。同時對結(jié)果還可附以必要的說明。
要注意圖表的規(guī)范:表格要有編號、標題;表格中數(shù)據(jù)要有單位(通常列在每一列頂端的第一行或每一行左端的第一列)。圖也要有編號、標題,標注在圖的下方;直角坐標圖的縱軸和橫軸要標出方向、名稱、單位和長度單位;電泳圖譜和層析圖譜等要標明正、負極方向及分離出的區(qū)帶、色帶或色斑的組分或成分。電泳結(jié)果還要標記泳道,并在圖題下給出泳道的注釋;要標出分子量標準的各條帶的大小。并且注意需要結(jié)合圖表對結(jié)果進行較詳細的解釋說明。
可分成以下三個等級給分。
優(yōu)秀:實驗結(jié)果有歸納、 解釋說明,結(jié)果準確,格式規(guī)范。
合格:堆砌實驗現(xiàn)象、數(shù)據(jù),解釋說明少。
不合格:最終實驗結(jié)果錯誤且無解釋說明,圖表、數(shù)字不規(guī)范。
(3)討論(20分)
討論應圍繞實驗結(jié)果進行,不是實驗結(jié)果的重述,而是以實驗結(jié)果為基礎(chǔ)的邏輯推論,基本內(nèi)容包括:①用已有的專業(yè)知識理論對實驗結(jié)果進行討論,從理論上對實驗結(jié)果的各種資料、數(shù)據(jù)、現(xiàn)象等進行綜合分析、解釋,說明實驗結(jié)果,重點闡述實驗中出現(xiàn)的一般規(guī)律與特殊性規(guī)律之間的關(guān)系。
生物實驗報告13
實驗名稱:用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動
一、實驗目的
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的.光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。
活細胞中的細胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),觀察細胞質(zhì)的流動,可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動做為標志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
四、實驗過程(見書p30)
1.制作蘚類葉片的臨時裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時裝片
4.用顯微鏡觀察細胞質(zhì)流動
五、討論
1.細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動,為什么?
2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3.植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),這對于活細胞完成生命活動有什么意義?
4.用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。
生物實驗報告14
一、實驗目的
1. 初步學會觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實驗原理
當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入外界溶液中,使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細胞壁逐漸分離開,也就是分升了質(zhì)壁分離當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,外界溶液中的水分就透過原生質(zhì)層進入細胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實驗過程(見書P60)
物理實驗報告 ——化學實驗報告 ——生物實驗報告 ——實驗報告格式 ——實驗報告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?
2.當紅細胞細胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?
3.畫一個細胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過清水處理的細胞變化的一系列模式圖。
生物實驗報告15
實驗一:練習使用顯微鏡
目的要求:
1.練習使用顯微鏡,學會規(guī)范的操作方法。
2.能夠獨立操作顯微鏡。
3.能夠?qū)吮疽苿拥揭曇爸醒耄⒖吹角逦膱D象。
材料用具:顯微鏡,寫有“上”字的玻片,動、植物玻片標本,擦鏡紙,紗布。
方法步驟
1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。
2.把顯微鏡放在實驗臺距邊緣7厘米左右處,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
3.動轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準通光孔。
4.把一個較大的光圈對準通光孔。一只眼注視目鏡內(nèi),另一只眼睜開。轉(zhuǎn)動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。
5.把所要觀察的玻片標本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止此時眼睛一定要看著物鏡)。
7.一只眼向目鏡內(nèi)看,同時逆時針方向轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉(zhuǎn)動細準焦螺旋,使看到的物象更加清晰。
8.練習將所觀察的標本移到視野中央,先移動一下標本,物象朝相反的方向移動。說明了在目鏡中看到的像是真實的像的倒像。
注意事項
實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。如需擦拭目鏡和物鏡,請用擦鏡紙。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,把兩個物鏡偏到兩旁,并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進鏡箱里,送回原處。
討 論
1.顯微鏡的使用步驟有哪些?
答:1、取鏡和安放2、對光3、觀察(放片、調(diào)焦) 4、清潔與收鏡
2.使用顯微鏡觀察時,為什么在下降鏡筒時眼睛要注視物鏡?
答:物鏡把載玻片壓碎,也容易劃傷物鏡。
3.在顯微鏡下能看清寫在不透明紙上的“上”字嗎?
答:看不到,不透明的紙會阻擋光線從物鏡進入光筒再從目鏡射出,所以可能什么也看不見。
實驗時間:20xx.9.15
實驗二:觀察植物細胞
實驗目的:
1、制作植物細胞的臨時裝片,學習制作臨時裝片的基本辦法.
2、認識植物細胞等基本結(jié)構(gòu). 3、練習畫細胞結(jié)構(gòu)圖.
實驗準備:
分組實驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。
實驗過程:
一、制作洋蔥表皮玻片標本
1、用潔凈地紗布把載玻片擦拭干凈。
2、把載玻片放在實驗臺上,用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。
制作臨時裝片
3、用鑷子從洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)撕取一小塊透明在膜——內(nèi)表皮。把撕下的內(nèi)表皮浸入載玻片的水滴中,用鑷子把它展平。
4、用鑷子夾起蓋玻片,是它的一邊先解除4載玻片上的水滴,然后緩緩地放下,蓋在要觀察的材料上,這樣才能避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡而影響觀察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側(cè)。
6、用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引,使染液浸潤標本的全部。
三、觀察洋蔥表皮細胞
利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞,先用低倍鏡下觀察,再在高倍鏡下觀察。
四、洋蔥鱗片葉表皮細胞圖。
五、實驗結(jié)束。
回收實驗器材,整理實驗桌。
實驗時間: 20xx.9.22
實驗三:觀察人體口腔上皮細胞
目的要求:
1. 制作和觀察人體口腔上皮細胞的臨時裝片
2. 認識人體口腔上皮細胞的結(jié)構(gòu)
3. 熟練畫細胞結(jié)構(gòu)圖
材料用具:
顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽 方法步驟
(一) 制作人口腔上皮細胞的臨時裝片
1. 用紗布擦凈載玻片、蓋玻片(很薄,應輕擦)
2. 在載玻片中央滴一滴生理鹽水(0.9%),說明:為什么用0.9%的生理鹽水,觀
察洋蔥表皮裝片用清水,都是為了讓細胞所處的環(huán)境和它們所生活的環(huán)境相同,
不至于脹破或變形,使細胞保持原狀。
3. 漱凈口。目的:將口腔的飯粒清除,以保證所取的細胞純度。
4. 用牙簽在口腔內(nèi)壁輕劃幾下,將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中,盡量涂均勻。
5. 蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片,使它的一側(cè)先接觸載玻片的水滴,然后慢慢放
平(注意:避免產(chǎn)生氣泡)。
6. 染色。①在蓋玻片一側(cè)滴加稀碘液,②用吸水紙在蓋玻片另一側(cè)吸引,使染液
浸潤標本的全部。
(二) 用顯微鏡觀察。
使用顯微鏡①安放②對光③放置玻片標本,調(diào)節(jié)焦距,用眼觀察,在視野中會看到被染成桔黃色的上皮細胞.
(三)繪圖:
人體口腔上皮細胞模式圖
。ㄋ模┱恚呵鍧嵅F瑥U物放在指定位置。
歸納討論:人的口腔上皮細胞有哪些基本結(jié)構(gòu),植物細胞和動物細胞相同和不同之處。 答:人的口腔上皮細胞的基本結(jié)構(gòu)有細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核;植物細胞與動物細胞相比,細胞壁、葉綠體和液泡是植物細胞特有的。
實驗時間: 20xx.9.27
實驗四:觀察人體的基本組織
目的要求:
1.觀察人體基本組織的永久切片,認識人體的四種基本組織;
2.描述同一種組織中細胞的共同特點;
3.描述不同組織中細胞形態(tài)上的不同之處;
4.根據(jù)觀察,概述組織的共同特點,形成組織的概念。
材料器具:
顯微鏡;扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片;橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片;骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結(jié)締組織玻片;神經(jīng)組織的玻片。
方法步驟:
1.根據(jù)教師提供的玻片,逐個在顯微鏡低倍鏡下認真觀察,注意細胞的形態(tài)特征和細胞間的聯(lián)系特點。
2.根據(jù)觀察,同組間的同學互相討論,認真填寫下表。
主要分布位組織類型 主要特征 功能 舉例 置
皮膚,消化 皮膚,小腸腺上皮組織 排列緊密形成表面 保護,分泌 道 上皮
四肢,軀 骨骼肌,平滑肌肉組織 呈長條狀緊密排列 干,內(nèi)臟器 收縮,舒張 肌 官
支持,連接, 軟骨,軟組結(jié)締組織 細胞之間間隙較大 全身各處 保護,營養(yǎng) 織,血液
產(chǎn)生傳導興神經(jīng)組織 形狀獨特呈發(fā)散狀 神經(jīng)系統(tǒng) 神經(jīng)纖維 奮
實驗時間:20xx.10.26
實驗五:觀察葉片結(jié)構(gòu)
目的要求:
1,練習徒手切片.
2認識葉片的結(jié)構(gòu).
3畫葉片的表皮細胞和保衛(wèi)細胞圖.
材料用具:
新鮮葉片,顯微鏡,雙面刀片,鑷子,載玻片,蓋玻片,葉片的永久切片,盛有清水的培養(yǎng)皿,滴管,吸水紙,碘液,紗布,毛筆,小木板.
方法步驟:
一,練習徒手切片,制作葉片橫切片的臨時切片
1,把新鮮的葉片平放在小木板上.
2,右手捏緊并排的兩片刀片,沿著圖中虛線的方向,迅速切割.
3,刀片的夾縫中春游切下的薄片.要多切幾次(每且一次,刀片要咱蘸一下稅)。把切下的薄片放入水中。
4,用毛筆蘸出最薄的一片,制成臨時切片。
二,觀察葉片的結(jié)構(gòu)
1用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時切片,再觀察葉片的永久橫切片。
2在顯微鏡下分清業(yè)的表皮,葉肉和葉脈。
三,觀察葉片的下表皮
1用鑷子撕下一小塊葉片(如蠶豆葉片的下表皮,制成臨時裝片。
2 用顯微鏡進行觀察,看一看葉片下表皮的細胞是什么樣子的,下表皮上有沒有氣孔?下表皮氣孔多于上表皮。
四,實驗結(jié)果。
討論:保衛(wèi)細胞和它周圍的細胞在結(jié)構(gòu)上有什么不同?保衛(wèi)細胞的這種結(jié)構(gòu)特點對蒸騰作用有什么意義?
答:當水分充足時,保衛(wèi)細胞膨脹張開,則氣孔張開,這時,蒸騰作用很強;當水分不充足時,保衛(wèi)細胞收縮關(guān)閉,則氣孔關(guān)閉,這時,蒸騰作用變?nèi)。保衛(wèi)細胞能夠控制氣孔開關(guān),所以也就能起到促進或減緩蒸騰作用的意義。
實驗時間:20xx.12.5
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