微生物實(shí)習(xí)報(bào)告
在我們平凡的日常里，報(bào)告使用的次數(shù)愈發(fā)增長，報(bào)告包含標(biāo)題、正文、結(jié)尾等。一聽到寫報(bào)告就拖延癥懶癌齊復(fù)發(fā)？以下是小編整理的微生物實(shí)習(xí)報(bào)告，供大家參考借鑒，希望可以幫助到有需要的朋友。
一、實(shí)習(xí)時(shí)間：
20xx.6.7-6.12
二、實(shí)習(xí)地點(diǎn)：
食品發(fā)酵實(shí)驗(yàn)室（化學(xué)樓119、123）、食品學(xué)院實(shí)習(xí)基地
三、實(shí)習(xí)目的：
1、學(xué)習(xí)自制酸奶的方法，熟悉從酸奶中分離和純化乳酸菌的一般方法。
2、掌握各類酸奶生產(chǎn)的基本工藝和要求。
3、學(xué)習(xí)奶酒的發(fā)酵過程、工藝流程，及其注意事項(xiàng)。
4、對自己所學(xué)的科學(xué)知識進(jìn)一步深化，提高實(shí)踐能力，整體策劃部署能力，動(dòng)手能力，組織能力，團(tuán)體協(xié)作能力，創(chuàng)新能力等方面也有一些提高。
四、實(shí)習(xí)內(nèi)容：
1.酵母菌篩選方案的確定
為了獲得最佳酵母菌發(fā)酵結(jié)果，我們通過對Internet資源以及圖書資料的搜索和查尋，查的產(chǎn)酯酵母廣泛應(yīng)用于白酒、黃酒、普通酒、醋、醬油中，另外，還應(yīng)用于果汁中。
所以我們準(zhǔn)備了三種菌種來源材料：果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。第一種方法是利用果皮做來源，將削下的果皮放入帶玻璃珠的三角瓶充分振搖，梯度稀釋，涂布于YPD瓊脂培養(yǎng)基上。第二種方法是用各種酒曲做為菌種來源，將酒曲粉碎，稱量，梯度稀釋，而后涂布于YPD瓊脂培養(yǎng)基上。第三種方法是利用保藏的酵母斜面作為菌種來源，用接種環(huán)在酵母斜面上取一環(huán)菌，而后用劃線法接種于YPD瓊脂平板上，帶用于實(shí)驗(yàn)。
經(jīng)過大家的`討論后，一致決定利用酵母斜面上的菌種，對其進(jìn)行培養(yǎng)。因?yàn)槔媒湍感泵嫔系木N在此次實(shí)習(xí)中可以用到我們實(shí)驗(yàn)上所學(xué)習(xí)的知識，真正將知識用于實(shí)踐，并在實(shí)踐中得到鞏固。但是，酵母斜面上的酵母菌制得的菌懸液濃度很大，所以在菌種篩選方面，我們將菌懸液10進(jìn)制稀釋到10-5,10-6,10-7的數(shù)量級，各濃度涂布兩個(gè)平板，另六個(gè)平板用于劃線分離法進(jìn)行菌種分離，30度培養(yǎng)24到48h，觀察平板上的菌落生長情況。初選出酵母菌，將菌落照片后就進(jìn)行顯微鏡觀察，篩選到典型的酵母菌株，進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)。將平板上的酵母單菌落接種保藏于斜面培養(yǎng)基（PDA）,30度培養(yǎng)48h后，4度冷藏。將PDA斜面培養(yǎng)基上保存的酵母菌接種于培養(yǎng)液中培養(yǎng)，而后接種于豆芽汁發(fā)酵液中，進(jìn)行發(fā)酵測產(chǎn)脂能力。
2.酵母菌的篩選及鑒定
11月25日我們按照討論決定的方案進(jìn)行了酵母菌的篩選實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如下：
2.1培養(yǎng)基的制備、分裝、滅菌（分述在下文中）
在實(shí)習(xí)中共需要準(zhǔn)備六種培養(yǎng)基：YPD培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、豆芽汁培養(yǎng)基、葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣培養(yǎng)基、硝酸鹽生化實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基、糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基。各培養(yǎng)基配方如下：
1、YPD培養(yǎng)基：1%酵母膏，2%蛋白胨，2%葡萄糖，2%瓊脂。
2、PDA培養(yǎng)基：2%馬鈴薯，2%葡萄糖，22%瓊脂。
秤取切成小塊的馬鈴薯，加水煮爛（20-30min），八層紗布過濾，濾液中加入葡萄糖，最后加入瓊脂。
3、豆芽汁培養(yǎng)基：10%黃豆芽，2%葡萄糖，2%瓊脂
洗凈豆芽，加水煮沸30min.用紗布過濾。濾液加入瓊脂，加熱溶解后放入糖，攪拌使它溶解，補(bǔ)水至設(shè)定值。
4、糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣培養(yǎng)基：營養(yǎng)物（0.5%牛肉膏，1%蛋白胨，0.3%氯化
鈉，0.2%磷酸氫鈉，0.2%溴麝香草酚藍(lán)）配方為20g/1000ml，蒸餾水配制，pH7.4。分裝后加葡萄糖0.5%。
5、硝酸鹽生化實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基：0.3%牛肉浸膏，0.5%-1%蛋白胨，pH7.0（100ml培養(yǎng)基加入1g硝酸鉀）
6、糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基：營養(yǎng)物（0.5%牛肉膏，1%蛋白胨，0.3%氯化鈉，0.2%磷酸氫鈉，0.2%溴麝香草酚藍(lán)）配方為20g/1000ml，蒸餾水配制，pH7.4。分裝后加乳糖0.5%。
制備：由于第6種培養(yǎng)基同第4種培養(yǎng)基，則一組配制即可，再加上無菌水，共需制備六種，則將全班分成六個(gè)組，我們?yōu)榈?組，故配制過程如下：
�。�1）天平調(diào)平。
�。�2）準(zhǔn)確秤取7.8g營養(yǎng)物（配390ml），葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。
�。�3）將營養(yǎng)物放入搪瓷缸中，加入390ml蒸餾水，玻璃棒攪拌將其溶解。
�。�4）pH試紙測其pH是否為7.4，若不是，用氫氧化鈉溶液調(diào)到7.4。分裝：
�。�1）取三個(gè)250ml錐形瓶，每個(gè)錐形瓶中倒入130ml的上述溶液。
�。�2）將上述稱好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分別倒入三個(gè)錐形瓶中，搖晃錐形瓶使其溶解。
（3）將加入糖的營養(yǎng)液分別裝入12個(gè)試管中，每個(gè)試管用移液管放入10ml。
�。�4）將每兩個(gè)葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮紙?jiān)梢焕Γ疵?個(gè)試管扎成一捆，寫上班級、組別后待滅菌。
滅菌：將已經(jīng)包扎好的試管放入滅菌箱中，進(jìn)行滅菌待用。
以上就是我們組的制備過程，在這個(gè)過程中應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)：
1、稱量前天平要調(diào)平。
2、秤取營養(yǎng)物時(shí)應(yīng)準(zhǔn)確秤取。
3、溶解后注意調(diào)pH值到7.4
4、量取培養(yǎng)液時(shí)要準(zhǔn)確，特別是向試管中分裝時(shí)要用移液管。
2.2酵母菌的分離（詳述分離方法，培養(yǎng)條件及觀察到的菌落結(jié)果）
步驟過程：
1、倒平板：待YPD培養(yǎng)基冷卻至50度左右后，按無菌操作法倒12只平板（每皿約倒15ml），平置，待凝。
2、酵母菌稀釋：取1mL菌懸液放入裝有99ml的無菌水錐形瓶中，搖勻后再從錐形瓶中取1mL放入1號管，依次進(jìn)行，則管里酵母的濃度依次是10-2~10-7。
3、平板分離：依次從10-7，10-6，10-5的管里取稀釋液進(jìn)行涂布平板，YPD平板每個(gè)濃度涂兩個(gè)。
4、劃線法分離：用接種環(huán)從酵母斜面上取一環(huán)酵母，在酒精燈前按無菌操作法進(jìn)行劃線，將酵母接種于6個(gè)平板中。
5、恒溫培養(yǎng)：將12個(gè)培養(yǎng)皿平板置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)24~48小時(shí)。結(jié)果：
觀察菌落：出現(xiàn)了4種不同形態(tài)的菌落。
①圓形，菌落大，表面光滑，濕潤，突起，乳白色。
�、趫A形，菌落略小，濕潤，突起，質(zhì)地均勻，呈乳白色。
�、蹤E圓形，菌落略小，濕潤，突起，顏色均一，呈乳白色。
④橢圓形，菌落大，濕潤，突起，顏色均一，呈乳白色。
結(jié)果分析：
通過網(wǎng)上查閱資料顯示，正常條件下大多數(shù)酵母菌的菌落特征與細(xì)菌相似，但比細(xì)菌菌落大而厚，菌落表面光滑、濕潤、粘稠，容易挑起，菌落質(zhì)地均勻，正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一，菌落多為乳白色，少數(shù)為紅色，個(gè)別為黑色。啤酒酵母的菌落紅酵母的菌落各種酵母菌的菌落。
將我們觀察的結(jié)果與資料相比，確實(shí)符合大多數(shù)酵母菌的菌落形態(tài)。結(jié)論：觀察到的是酵母菌落。
2.3酵母菌的初步鑒定（包括革蘭氏染色和糖代謝實(shí)驗(yàn)）
2.3.1將平板上分離到的各菌株進(jìn)行簡單染色后進(jìn)行鏡檢
觀察結(jié)果為：
球菌，各個(gè)細(xì)胞的形狀比較規(guī)整。
結(jié)論：
通過菌體個(gè)體形態(tài)和菌落形態(tài)，初步確定出了一株酵母菌。
注意事項(xiàng)：
1、搬動(dòng)顯微鏡時(shí)應(yīng)一手握住鏡臂，另一手托住底座，鏡身保持直立，并緊靠身體，步態(tài)穩(wěn)健。切記單手拎提，以免目鏡頭從鏡筒上掉出而砸壞。
2、各個(gè)鏡面切忌用手涂抹，以免手上的油、汗污染鏡面，造成發(fā)霉、腐蝕。
2.3.2將初步確定的菌株進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)
步驟過程：
用接種環(huán)從平板上挑取已分離的同一菌落接種于糖發(fā)酵管和硝酸鹽生化管中，接種完后30℃培養(yǎng)。24小時(shí)后觀察結(jié)果。
與此同時(shí)，將平板上的酵母單菌落接種保藏于斜面培養(yǎng)基（PDA），30度培養(yǎng)48小時(shí)后，4度冷藏，待檢其他特性。
結(jié)果：
驗(yàn)中并沒有觀察到，但硝酸鹽管中變黃，則分析結(jié)果，可能是酵母菌生長不旺盛，導(dǎo)致即使產(chǎn)氣也看不出來。
根據(jù)這一現(xiàn)象，能夠說明該菌株具有產(chǎn)酸產(chǎn)氣性能，確定此菌株確實(shí)是酵母菌。
3、發(fā)酵產(chǎn)酯實(shí)驗(yàn)（11.23-11.24）
步驟過程：
�。�1）準(zhǔn)確吸取25ml發(fā)酵液于250ml錐形瓶中，加入25ml蒸餾水，滴2滴酚酞指示劑，用0.1mol/L的氫氧化鈉滴至微紅色，記下消耗氫氧化鈉溶液的體積。
�。�2）將滴定后的發(fā)酵液轉(zhuǎn)移至250ml錐形瓶中，準(zhǔn)確加入15ml上述氫氧化鈉標(biāo)液，接上冷凝管，加熱至沸回流30min。
�。�3）取下冷卻至室溫，完全轉(zhuǎn)移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的鹽酸溶液滴定至微紅色剛好消失，紀(jì)錄鹽酸溶液的用量，記錄總酯的含量。結(jié)果：
氫氧化鈉消耗體積：V1=1.9ml
鹽酸消耗體積：V2>15ml
分析與結(jié)論：氫氧化鈉消耗體積1.9ml用來預(yù)估總酯含量，且其越大則總酯越少。由此可見，產(chǎn)酯量應(yīng)該不少。
按公式：總酯=（15-V2）X0.1X10-3mol但是我們滴到18ml仍不見結(jié)果，并且沒有要到微紅的跡象�？赡苁怯捎谂渲茖�(shí)驗(yàn)試劑時(shí)出現(xiàn)問題，導(dǎo)致沒有測出總酯量。
五、總結(jié)
短短一周的微生物實(shí)習(xí)在緊張又有效率的節(jié)奏下順利的結(jié)束了。這是我們自己在老師協(xié)助下并親自動(dòng)手連續(xù)完成的一些列實(shí)驗(yàn)，在其中感受到了很多平時(shí)和課上很少遇到的東西，有自主，有探索，有反思，有合作
短暫的實(shí)習(xí)轉(zhuǎn)眼而過，回顧實(shí)習(xí)生活，我在實(shí)習(xí)的過程中，既有收獲的喜悅，也有一些遺憾。喜悅是我們都在老師的指導(dǎo)下自主設(shè)計(jì)了方案并分工鮮明，合理掌握每一步實(shí)驗(yàn)用時(shí)及時(shí)、準(zhǔn)確測量數(shù)據(jù)，最終都得到了相應(yīng)的結(jié)果。而遺憾那就是對實(shí)驗(yàn)有些方面的認(rèn)識僅僅停留在表面，只是在看人做，聽人講如何做，未能夠親身感受、具體處理一些工作，所以未能領(lǐng)會(huì)其精髓。但時(shí)通過實(shí)習(xí)，加深了我對實(shí)驗(yàn)和微生物基本知識的理解，豐富了我的微生物實(shí)驗(yàn)的知識，使我對實(shí)驗(yàn)有了深層次的感性和理性認(rèn)識。認(rèn)識到要做好實(shí)驗(yàn)，既要注重理論知識的學(xué)習(xí)，更重要的是要把實(shí)踐與理論兩者緊密相結(jié)合。更進(jìn)一步體會(huì)到了“實(shí)踐是最好的老師”的深刻意義。
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