甲氨蝶呤(MTX)的釋放度分析論文范本
1 器材
Zeta Sizer 3000HS型激光粒度分析儀（英國(guó)Malvern公司）；SPA-400原子力顯微鏡（日本精工公司）；vc 130 探頭式超聲處理機(jī)（美國(guó)Sonics&Materials公司）；UV-1600紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京瑞利）。聚乙交酯丙交酯（PLGA，成都航利生物材料研究所）；聚乙烯醇（湘中精細(xì)化學(xué)品廠）。甲氨蝶呤（MTX，浙江萬(wàn)馬藥業(yè)公司）。
2 方法
2.1 納米顆粒的制備與表征參照文獻(xiàn)方法［3］，加以改進(jìn)，稱取MTX 5 mg和50 mg PLGA［L:G=50:50，L:G為共聚物PLGA中乳酸（Lactide）和乙醇酸（Glycolide）單體的質(zhì)量比］溶于2 ml二氯甲烷，滴加入8 ml質(zhì)量百分比為2.5%聚乙烯醇水溶液中，在冰浴下用探針式的超聲波超聲10 min。減壓除去二氯甲烷，3 000 r/min離心分離，所得的沉淀用超純水洗滌3次，制得包載MTX的PLGA納米顆粒。取少許顆粒加水混勻稀釋，取樣滴于云母片上，自然干燥后，利用原子力顯微鏡表征納米顆粒形貌。載藥的納米顆粒的平均粒徑、粒度分布以及Zeta電位通過(guò)Malvren Zetasizer 3000HS分析儀測(cè)定。
2.2 納米顆粒的體外釋放凍干包載MTX的PLGA納米顆粒，精確稱取凍干粉末10 mg，溶于3 ml氯仿中，然后加入7 ml甲醇，沉淀聚合物，10 000 r/min離心10 min，以分光光度法測(cè)得上清液中MTX的含量。精密稱取10 mg凍干納米顆粒置于透析袋中，加入PBS緩沖溶液（pH=7.4）5 ml，將透析袋置于50 ml PBS緩沖溶液中，保持溫度37℃，每隔一定時(shí)間取1 ml（同時(shí)補(bǔ)充等量同溫介質(zhì)），用分光光度法測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)的MTX的含量，計(jì)算藥物的釋放率，繪制釋藥曲線。
3 結(jié)果
3.1 納米顆粒的特性表征本研究制備的包載MTX的PLGA納米顆粒為淺棕色的物質(zhì)，Zeta電位為-18.7 mV，納米顆粒的原子力圖見(jiàn)圖1（a），制備出來(lái)的納米顆粒都為較完整的球形，分散性好，顆粒粒徑較均勻。粒徑分布如圖1（b）所示，顆粒的平均粒徑為175.9 nm，粒徑分布范圍為18～225 nm，其中小于51 nm占99%，顆粒大小基本上與原子力圖吻合。
3.2 體外藥物釋放曲線包載MTX的PLGA納米顆粒的體外釋放如圖2所示，該納米顆粒的體外釋放存在兩相，前4h處于快速釋放期，釋放的MTX累積量達(dá)到加入總量的.42.9%，在該階段，存在于顆粒表面的藥物較快地釋放出來(lái)；此后進(jìn)入緩慢釋放期，隨后的68h釋放量相當(dāng)于藥物總量的36.9%，存在于顆粒中的藥物逐漸釋放出來(lái)。
3.3 模型擬合R2為決定系數(shù)，是判斷回歸方程擬合度的重要指標(biāo)。R2越趨向于1，擬合的效果越好［4，5］。由表2可見(jiàn)，包載MTX的PLGA納米顆粒的釋藥過(guò)程采用雙相動(dòng)力學(xué)方程擬合得到的R2為0.995 7，最接近1。說(shuō)明整個(gè)釋藥過(guò)程分為兩相，前期為快速釋放相，后期為緩慢釋放相，此釋藥特點(diǎn)符合緩釋原理。
甲氨蝶呤（MTX）是一種抗代謝類抗腫瘤藥物，對(duì)乳腺癌、急 性白血病、骨肉瘤等都具有顯著的療效，但其有引起骨髓抑制細(xì)胞下降，肝腎功能損傷等毒副作用，甚至危及患者生命［1,2］。為降低MTX的毒副作用，提高藥物療效，本研究以生物可降解材料聚乙交酯丙交酯（PLGA）為材料，制備了包載MTX的PLGA納米顆粒，考察其在PBS緩沖溶液的釋放行為，并采用多種數(shù)學(xué)模型擬合體外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，確定最佳的擬合模型。
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