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      2. 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告

        時間:2021-01-15 10:00:28 報告 我要投稿

        細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告

          隨著個人的素質(zhì)不斷提高,報告不再是罕見的東西,多數(shù)報告都是在事情做完或發(fā)生后撰寫的。你還在對寫報告感到一籌莫展嗎?下面是小編為大家收集的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告,僅供參考,歡迎大家閱讀。

        細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告

        細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告1

          一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

          1、掌握顯示細(xì)胞中過氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。2.了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義

          3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測方法

          二、實(shí)驗(yàn)原理:

          1、細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

          2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。

          3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

          三、實(shí)驗(yàn)步驟:

          細(xì)胞中過氧化物酶的顯示

          1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;

          2、取骨髓細(xì)胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中,摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上;

          3、涂片:用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個方向涂布推開,室溫晾干;

          4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘(以蓋滿涂片為宜)6、清水沖洗,番紅復(fù)染2min。

          7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)

          細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀察吉姆薩染色:

          1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞3、95%乙醇固定5min

          4、PBS緩沖液洗2次

          5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

          7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:

          1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞

          3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min

          5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

          6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。

          四、結(jié)果與分析:

          1、根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個視野的統(tǒng)計,該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9

          Hela細(xì)胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)

          五、思考題:

          1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制

          細(xì)胞凋亡是一個受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動自殺過程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對細(xì)胞凋亡的調(diào)控。

          2、細(xì)胞凋亡的特征

          凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。

          3、研究細(xì)胞凋亡的方法

          定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)

          定量或半定量的研究方法:各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

        細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告2

          一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

          1、通過對原核和真核各種形態(tài)細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察,了解細(xì)胞的`形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu);

          2、學(xué)習(xí)顯微測量的方法,對細(xì)胞的大小有一直觀認(rèn)識。

          二、實(shí)驗(yàn)材料和儀器:

          小白鼠肝細(xì)胞切片;雞血紅細(xì)胞;蠶豆葉片橫切片;

          普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。

          三、實(shí)驗(yàn)步驟:

          (一)細(xì)胞形態(tài)觀察

          l、動物細(xì)胞的觀察

         。1)人肝細(xì)胞切片:在顯微鏡下仔細(xì)觀察肝細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造。

         。2)雞血細(xì)胞涂片的觀察:觀察血細(xì)胞的組成;紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。

          2、植物細(xì)胞的觀察

          取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。

         。ǘ┘(xì)胞的大小和測量

          1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。

          2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺測微尺的分度。

          3、小心移動鏡臺測微尺和轉(zhuǎn)動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉(zhuǎn)動目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。

          4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數(shù)。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:

          鏡臺測微尺的格數(shù)

          目鏡測微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10

          目鏡測微尺的格數(shù)

          四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

          1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24

          2、細(xì)胞大小的測量:

          五、作業(yè)與思考:

          1、血細(xì)胞按含量高低,主要含有:紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板。

          白細(xì)胞最大,紅細(xì)胞次之,血小板最小。紅細(xì)胞:主要的功能是運(yùn)送氧。 白細(xì)胞:主要扮演了免疫的角色,當(dāng)病菌侵入人體時,白細(xì)胞能穿過毛細(xì)血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過程中起著重要作用。細(xì)胞形態(tài)見下圖。

          2、植物細(xì)胞一般比動物細(xì)胞大一些。形態(tài)圖見下。

          3、在不同放大倍數(shù)下,測定的細(xì)胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數(shù)越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測量準(zhǔn)確。

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