細胞生長曲線的繪制實驗報告范文
篇一：實驗五 微生物生長量的測定及生長曲線的繪制
一、實驗目的
學習了解微生物生長量測定的方法
學習了解細菌生長曲線的繪制方法
學習掌握血細胞計數(shù)板的使用方法
�。ㄒ唬┪⑸锷L量的測定
計數(shù)法 重量法 生理指標法
1、顯微鏡直接計數(shù)法
�。�1）利用血細胞計數(shù)板計數(shù)
�。�2）涂片計數(shù)
2、活菌菌落計數(shù)法
3、濾膜法
�。ǘ┘毦L曲線
將單細胞細菌接種到恒定容積的液體培養(yǎng)基中，不補充營養(yǎng)物或移去培養(yǎng)物，細菌以二分裂方式繁殖，以時間為橫坐標，細菌數(shù)目的對數(shù)值為縱坐標，可畫出一條反映細菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線，稱為生長曲線（growth curve）
篇二：細胞生長曲線的測定
細胞生長曲線的測定
一、實驗目的
掌握測定細胞生長曲線的.方法。
二、實驗器具
24孔細胞培養(yǎng)板、微量加樣器、eppendorf管、吸頭、吸頭盒、顯微鏡、細胞計數(shù)板、載玻片、蓋玻片、吸管、試管架、普通顯微鏡、細胞懸液、0.4%臺盼藍。
三、實驗方法
1. 培養(yǎng)細胞：首先在24孔細胞培養(yǎng)板內(nèi)分別接種相同數(shù)量的細胞，計數(shù)并記錄接種的細胞懸液密度，接種時間記為0小時。
2. 計數(shù)細胞密度：從接種時間算起，每隔24小時計數(shù)3孔的細胞密度，算出平均值。為提高準確率，對每孔細胞可計數(shù)2-3次，如此操作至第七天結束。
3. 繪制曲線：以培養(yǎng)時間為橫坐標、細胞密度為縱坐標，將全部結果在坐標紙上繪圖，即得所培養(yǎng)細胞的生長曲線。
篇三：MTT法繪制生長曲線
實驗材料：
1，5%FBS-L-DMEM, 5x104個/ml細胞懸液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7個,酶標儀,50ml離心管，1.5ml離心管，0.22μm濾膜，錫箔紙，MTT工作液（1ml/管）
實驗步驟：
1， 分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制備成細胞懸液，調(diào)整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板，每孔接種200μl細胞懸液進行培養(yǎng)（每孔1x104細胞）。
2， 培養(yǎng)16-48后，每天選擇6個培養(yǎng)孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃繼續(xù)孵育。
3， 孵育4h后終止培養(yǎng)，吸出孔內(nèi)上清，此時應該傾斜96孔板，用槍頭小心的將上清液吸去，不可吸去下面的結晶顆粒，慢慢吸去。每孔加入150μlDMSO,室溫振蕩10min，使結晶充分溶解，于試驗孔平行設不加細胞只加培養(yǎng)液的空白對照1孔。
注意事項：
【1】 1, 兩種方法分離小型豬骨髓間充質(zhì)干細胞的比較
分別取兩組0,1,3代細胞，制成1x103的細胞懸液，接種到96孔板，每孔細胞懸液200微升，置37℃、5%CO2飽和濕度孵箱內(nèi)孵育，各組每24小時分別取出4孔，每孔加入MTT（2mg/ml）20微升 37℃孵育，4h后吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)液，每孔加入150微升分析純的二甲基亞砜，移至酶聯(lián)免疫檢測儀上振蕩10min,用分光光度計在492nm波長處測定每孔的吸光度值（OD492），以OD(492)值為縱坐標，時間為橫坐標繪制生長曲線
【2】 來自：SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)的實驗研究
大鼠MSCs生長曲線測定：為了定量測定大鼠BMSCs的生長狀況，對來源于同一動物的原代細胞進行連續(xù)培養(yǎng)。分別選取生長良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制備成細胞懸液，調(diào)整細胞密度為5x104/ml。接種到96孔板，每孔接種200μl細胞懸液進行培養(yǎng)（每孔1x104細胞）。次日起每天選擇6個培養(yǎng)孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃繼續(xù)孵育4h后終止培養(yǎng)，吸出孔內(nèi)上清，每孔加入150μlDMSO,室溫振蕩10min，使結晶充分溶解，于試驗孔平行設不加細胞只加培養(yǎng)液的空白對照1孔。在酶標儀上選擇570nm波長，以空白孔調(diào)零，測定各孔吸光度（A）值，連續(xù)測7天，以時間為橫軸，A值為縱軸繪制細胞生長曲線。
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