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從菠菜中提取葉綠素實驗報告三篇
從菠菜中提取葉綠素實驗報告一
【實驗目的】
1、通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質的分離提純與方法。
2、通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機物色譜分離鑒定的原理。
【實驗原理】
葉綠色存在兩種結構相似的形式即葉綠素a{C55H77O5N4Mg}和葉綠素b{ C55H70O6N4Mg }；胡蘿卜素是具有長鏈結構的共軛多烯，有三種異構體；葉黃素C40H56O2是胡蘿卜素的羥基衍生物。當提取時，從上到下顏色依次為：黃綠色，藍綠色，黃色和橙色。
【實驗儀器】
研缽，色譜柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化鋁，菠菜葉，燒杯，漏斗，玻璃棒，濾紙，剪刀，脫脂棉，紗布。
【實驗步驟】
1、稱取30g洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉，用剪刀剪碎，放入研缽中研磨，研磨時放入少量碳酸鈣，防止研磨過猛破壞葉綠素結構，研磨至爛。
2、將研磨碎的菠菜葉轉入小燒杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，蓋上表面皿，防止有機溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。
3、浸泡期間，填充色譜柱，在最下面墊入脫脂棉，再蓋上一個小濾紙片，裝入氧化鋁至4/5處，再蓋上一層濾紙片。
4、將燒杯中的菠菜葉連帶著有機溶劑用紗布擠入漏斗中，轉入分液漏斗，加入10mL水洗滌，除去水層（下層），再用10mL水洗滌一次。
5、將分頁漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱中，加幾滴丙酮既可以看到顏色變化。
6、洗凈儀器，收拾實驗室，打掃衛(wèi)生。
【實驗記錄】
雖然分層現(xiàn)象不是非常明顯，但是還是可以看得見分層現(xiàn)象。
【結果與討論】
1、做這個實驗的時候，我覺得不應該用紗布擠干，因為個人感覺很多色素都被
紗布吸走了，導致后來的實驗現(xiàn)象沒有很明顯，經過對比，沒用紗布直接過濾的同學做出的`現(xiàn)象比用紗布做的現(xiàn)象要明顯的多。
2、有機溶劑往往比較容易揮發(fā)，所以加入后要蓋上表面皿。
3、此實驗浸泡15分鐘以后現(xiàn)象就可以很明顯，因此以后在課堂上給學生演示的時候浸泡的時間不是越長越好的，15分鐘足矣。
4、若最后顏色沒有明顯的分層，可以加入幾滴丙酮幫助分層。
從菠菜中提取葉綠素實驗報告二
綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素（綠）、胡蘿卜素（橙）和葉黃素（黃）等多種天然色素。
葉綠素存在兩種結構相似的形式即葉綠素a(C55H72O5N4Mg)和葉綠素b(C55H70O6N4Mg))，差別僅是a中一個甲基被b中的甲酰基所取代。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡合物，是植物進行光合作用所必需的催化劑，也是食用的綠色色素，可用于糕點、飲料水等中，添加于膠姆糖中還可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。盡管葉綠素分子中含有一些極性基團，但大的烴基結構使它易溶于石油醚等一些非極性溶劑。
胡蘿卜素（C40H56）是具有長鏈結構的共軛多烯。它有三種異構體α—，β—,和γ—胡蘿卜素，其中β—異構體含量最多，也最重要。生長期較長的綠色植物中，異構體中β—的含量多達90％。β—具有維生素A的生理活性，其結構是兩分子維生素A在鏈端失去兩分子水結合而成。生物體內，β—體受酶催化氧化即形成維生素A。目前，β—體可作為維生素A使用，也可作為食品工業(yè)的色素，β一胡蘿卜素還有防癌功能。
葉黃素（C40H56O2）是胡蘿卜素的羥基衍生物，在光合作用中能起收集光能的作用。在綠葉中通常是胡蘿卜素的兩倍。較易溶于醇而在石油醚中溶解度較小。 由此可見，葉綠素等天然色素有廣泛的用途，對于色素的提取與分離就顯得很重要了．本實驗就提取和分離做了相關的研究。
1 實驗部分
1.1 儀器與試劑
儀器：研缽、分液漏斗、顯微載玻片、毛細管、層析柱(20×10 cm)、UV-240
紫外分光光度計
試劑：石油醚、乙醇(95%)、菠菜葉、丙酮(化學純)、乙酸乙酯(化學純)、無
水硫酸鈉、硅膠G、中性氧化鋁(150目～160目)
1.2 提取與分離
1.2.1 浸泡法提取色素
在研缽中放入20 g新鮮的菠菜葉，加入20 mL3：2(體積比)石油醚—乙醇混合液，適當研磨(不要研成糊狀，否則會給分離造成困難)，用傾析法將提取液轉
移到分液漏斗中，每次用10ml水洗滌兩次,以除去萃取液中的乙醇。洗滌時要輕輕旋蕩，以防乳化。棄去水乙醇層，石油醚層用無水硫酸鈉干燥，干燥后濾入小圓底燒瓶，在水浴上蒸發(fā)濃縮至大約l m L。
1.2.2 薄層層析
取四塊顯微載玻片，硅膠G經0.5％羧甲基纖維素鈉調制后制板，在室溫下晾干后在110°C活化1h。選取效果最好的一塊進行點樣。
展開劑：（1）石油醚—丙酮=8:2（體積比）
�。�2）石油醚—乙酸乙酯=6:4（體積比）
取活化后的層析板，點樣，放入預先選定展開劑的廣口瓶。瓶的內壁貼一張高5cm，繞周長4／5的濾紙，下部浸入展開劑中，蓋上瓶蓋。待展開劑上升至規(guī)定高度時，取出層析板，晾干，做出標記。
分別用兩種展開劑展開，比較不同展開劑的展開效果。觀察斑點在板上的位置并排列出胡蘿卜素、葉綠素和葉黃素的Rf值的大小。注意更換展開劑時，需干燥層析瓶，不允許前一種展開劑帶入后一系統(tǒng)。
1.2.3 柱層析
取少量脫脂棉在小燒杯中用石油醚浸潤后，擠壓除去氣泡，放在層析柱底部。在層析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化鋁8克，打開柱下活塞，保持石油醚高度不變，氧化鋁在柱子中堆積。裝完后，打開下端活塞，放出溶劑，直到氧化鋁表面剩下1—2mm高為止（不能使氧化鋁表面露出液面）。
將濃縮液用滴管加到柱頂部，打開下端活塞，讓液面下降到柱面以下1mm,關閉活塞，加數(shù)滴石油醚，打開活塞，使液面下降，幾次反復，使色素全部進入柱體。
在柱頂加1.5cm洗脫劑——9：1（體積比）石油醚—丙酮。打開活塞，用錐形瓶收集。當?shù)谝粋�有色成分即將滴出時，取另一錐形瓶收集，得橙黃色溶液，即胡蘿卜素。
2.結果與討論
2.1提取
由于甲醇與乙醇的極性相近，但是乙醇易得、無毒，所以用3：2的石油醚一乙醇通過浸泡的方法提取菠菜色素，而不是用石油醚—甲醇。
2.2分離
薄層層析
薄層層析又叫薄層色譜，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，屬固—液吸附色譜，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，可以用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離。實驗中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)（薄層色譜法中原點到斑點中心的`距離與原點到溶劑前沿的距離的比值）列表如下：
在一定的色譜條件下，特定化合物的Rf值是一個常數(shù)，因此有可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。
菠菜色素中各種色素的比移值Rf大小為：胡蘿b素> 葉黃素>葉綠素，按此順序它們的非極性依次減弱。物質極性的判斷為柱層析中洗脫劑的選擇提供了參考價值。
柱層析
胡蘿卜素極性最小，因此胡蘿卜素的洗脫劑用極性較小的9：l的石油醚-丙酮溶劑效果較好。但要收集其他幾種色素得換用其他的洗脫劑，因為色素的極性各不相同，且有一定差別。如用7：3石油醚-丙酮分離葉黃素．分離出胡蘿卜素和葉
黃素后，可加大溶劑極性以較快速度洗脫葉綠素．用3：1：1的丁醇-乙醇-水洗
脫劑洗脫葉綠素。
3.結論
采用浸泡法提取色素比抽濾法更好。在薄層層析時，用石油醚-丙酮=8:2時，能更明顯的看到分層。在柱色譜洗脫劑的選擇上，基于薄層分析的極性判斷選擇了石油醚-丙酮=9:1的溶劑作為洗脫劑，取得了非常好的效果。通過實驗，進一步認識到洗脫劑在柱層析中的重要性。
從菠菜中提取葉綠素實驗報告三
【實驗目的】
1、通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質的分離提純與方法。
2、通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機物色譜分離鑒定的原理。
【實驗原理】
葉綠色存在兩種結構相似的'形式即葉綠素A(C55H77O5N4Mg)和葉綠素B（C55H70O6N4Mg）胡蘿卜素是具有長鏈結構的共軛多烯，有三種異構體；
葉黃素（C40H56O2）是胡蘿卜素的羥基衍生物。是胡蘿卜素的羥基衍生物。當提取時，從上到下顏色依次為：黃綠色，藍綠色，黃色和橙色。
【實驗儀器】
研缽，色譜柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化鋁，菠菜葉，燒杯，漏斗，玻璃棒，濾紙，剪刀，脫脂棉，紗布。
【實驗步驟】
1、稱取30g洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉，用剪刀剪碎，放入研缽中研磨，研磨時放入少量碳酸鈣，防止研磨過猛破壞葉綠素結構，研磨至爛。
2、將研磨碎的菠菜葉轉入小燒杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，蓋上表面皿，防止有機溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。
3、浸泡期間，填充色譜柱，在最下面墊入脫脂棉，再蓋上一個小濾紙片，裝入氧化鋁至4/5處，再蓋上一層濾紙片。
4、將燒杯中的菠菜葉連帶著有機溶劑用紗布擠入漏斗中，轉入分液漏斗，加入10mL水洗滌，除去水層（下層），再用10mL水洗滌一次。
5、將分頁漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱中，加幾滴丙酮既可以看到顏色變化。
6、洗凈儀器，收拾實驗室，打掃衛(wèi)生。
【注意事項】
1.過濾時不能用濾紙，而是用脫脂棉。原因是濾紙能吸收色素，降低濾液中色素的含量，使實驗效果不明顯。
2.加入丙酮后要迅速、充分研磨，以防止丙酮揮發(fā)，使更多的色素溶解在丙酮中。
3.萃取過程中注意操作，防止溶液噴出。制備薄層板過程中注意基板的質量，防止玻璃邊緣傷及手指。
4.牢記有機化學實驗常規(guī)安全防范和急救措施。
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